時(shí)間：2022-07-17 03:11:03
開(kāi)篇：寫(xiě)作不僅是一種記錄，更是一種創(chuàng)造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇免疫學(xué)檢驗(yàn)論文，希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過(guò)程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
實(shí)驗(yàn)教學(xué)用書(shū)為《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（電子版），是《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)》（康熙雄主編）的配套教材。我們根據(jù)教學(xué)重點(diǎn)應(yīng)該落實(shí)在實(shí)用性上，本著一切從實(shí)際出發(fā)的目的，盡量按照臨床免疫實(shí)驗(yàn)室常用的技術(shù)操作方法來(lái)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程。首先實(shí)驗(yàn)內(nèi)容要突出本學(xué)科的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)；其次，從醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)生的特點(diǎn)和大部分畢業(yè)生將來(lái)主要從事臨床檢驗(yàn)和基礎(chǔ)研究工作的需求出發(fā)，把重點(diǎn)放在讓學(xué)生掌握基本理論、基本操作技術(shù)上；另外，根據(jù)免疫學(xué)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域中的特點(diǎn)，增加對(duì)培養(yǎng)學(xué)生的科研素質(zhì)具有促進(jìn)作用的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。綜合考慮這幾個(gè)方面，我們將實(shí)驗(yàn)分為：（1）驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，包括經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、免疫細(xì)胞的分離；免疫球蛋白的提?。谎逖a(bǔ)體活性的測(cè)定；（2）設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，包括ELISA法的建立；臨床相關(guān)實(shí)驗(yàn)：包括間接熒光免疫法檢測(cè)抗核抗體；淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定等。另外，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展，臨床實(shí)驗(yàn)室不斷地向著自動(dòng)化方向發(fā)展，全自動(dòng)分析儀的操作在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中也是必不可少的。我們定期帶學(xué)生到醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室見(jiàn)習(xí)，讓他們了解臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)動(dòng)態(tài)及最新的檢驗(yàn)儀器、檢測(cè)方法和發(fā)展趨勢(shì)。這樣不僅解決了教學(xué)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備落后，資源不足的問(wèn)題，同時(shí)也避免了實(shí)驗(yàn)教學(xué)與臨床脫節(jié)的難題。
2精確分配實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)
《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)目的在于加深學(xué)生理解相關(guān)的理論知識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)際操作能力、觀察能力、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力以及創(chuàng)新能力。我們根據(jù)本專業(yè)學(xué)生培養(yǎng)目標(biāo)的要求，對(duì)整體教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行考察和分配，每次實(shí)驗(yàn)課安排在理論課之后，加深學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解和記憶。最后確定本門(mén)課程的教學(xué)時(shí)數(shù)為9時(shí)，其中理論課54學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)課45學(xué)時(shí)，理論課與實(shí)驗(yàn)課的比例為1.2：1。
3增加實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備投入，充分利于臨床醫(yī)院的資源優(yōu)勢(shì)
良好的實(shí)驗(yàn)室與儀器設(shè)備條件是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的最基本保障。近年來(lái)隨著臨床免疫學(xué)科的不斷完善和免疫學(xué)技術(shù)的成熟，以及基因組和蛋白組學(xué)的發(fā)展，醫(yī)學(xué)的各個(gè)學(xué)科均與此學(xué)科發(fā)生廣泛的交叉和滲透。相應(yīng)技術(shù)在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)上的應(yīng)用日益廣泛。因此，實(shí)驗(yàn)教學(xué)要為學(xué)生掌握這些新技術(shù)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，才能使學(xué)生在畢業(yè)后的工作中得心應(yīng)手。我們的實(shí)驗(yàn)課充分利用舊有設(shè)備，同時(shí)也爭(zhēng)取了新的投入。近年來(lái)，實(shí)驗(yàn)室增加了教學(xué)設(shè)備包括顯微鏡、離心機(jī)、自動(dòng)酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、水平電泳儀、分光光度計(jì)等。另外，由于自動(dòng)化的進(jìn)程加快，很多高精尖的設(shè)備應(yīng)用于臨床工作中。這些設(shè)備價(jià)格昂貴，教學(xué)實(shí)驗(yàn)室無(wú)力購(gòu)買(mǎi)。所以，我們充分利用各個(gè)教學(xué)醫(yī)院檢驗(yàn)科的資源優(yōu)勢(shì)，將部分實(shí)驗(yàn)課和見(jiàn)習(xí)課設(shè)置于教學(xué)醫(yī)院的檢驗(yàn)科，用臨床資源優(yōu)勢(shì)來(lái)彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的不足。
4采用靈活多樣的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法
實(shí)驗(yàn)課教師根據(jù)不同的教學(xué)內(nèi)容采用不同的教學(xué)方法，主要有PBL教學(xué)模式（problembasedlearning以問(wèn)題為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)）、LBL教學(xué)模式（lecturebasedlearning以授課為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)）、討論式教學(xué)模式、自主學(xué)習(xí)模式等。對(duì)于設(shè)計(jì)性較強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)，我們運(yùn)用了PBL教學(xué)模式，比如“ELISA檢測(cè)AFP方法的建立”，由教師提出與本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容相關(guān)的問(wèn)題，學(xué)生圍繞問(wèn)題進(jìn)行思維、推理和分析，教師只是起導(dǎo)向作用，不直接回答學(xué)生問(wèn)題，維持實(shí)驗(yàn)小組向既定的教學(xué)目標(biāo)進(jìn)行。對(duì)于相對(duì)復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容采用LBL教學(xué)模式，如“免疫細(xì)胞的分離”等。對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容采用自主學(xué)習(xí)模式，比如“凝集反應(yīng)”。學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，通過(guò)自學(xué)《臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》的內(nèi)容，進(jìn)行討論、交流，并完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。在各種教學(xué)方法中加入討論式教學(xué)模式。針對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)方法或?qū)嶒?yàn)結(jié)果，在教師指導(dǎo)下，全班或小組成員圍繞某一中心問(wèn)題各抒己見(jiàn)，發(fā)表自己的看法，通過(guò)師生間、學(xué)生間的多邊交流，相互探討，以求得真知。由于我們靈活運(yùn)用多種多樣的教學(xué)模式，充分調(diào)動(dòng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性，使實(shí)驗(yàn)課變得生動(dòng)有趣。同時(shí)，我們利用互聯(lián)網(wǎng)資源和多媒體技術(shù)將實(shí)驗(yàn)變得形象。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，將實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)儀器拍攝成錄像進(jìn)行播放。不僅能讓學(xué)生充分了解實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)所用的儀器等，還能糾正學(xué)生不正確的操作，激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
5將科研融入實(shí)驗(yàn)教學(xué)
教師隊(duì)伍科研能力的提高，對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)有強(qiáng)大的推動(dòng)作用。近年來(lái)，學(xué)校及醫(yī)院越來(lái)越重視科研能力的提高，各等級(jí)的科研項(xiàng)目數(shù)逐年增加。我們也嘗試將科研融入的臨床免疫實(shí)驗(yàn)教學(xué)中。比如“ELISA檢測(cè)AFP方法的建立”就是我們教師自己正在研究課題的部分內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)教學(xué)與科研的結(jié)合更能激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣，拓寬學(xué)生的視野，讓學(xué)生了解本學(xué)科發(fā)展的動(dòng)態(tài)和前沿。
6建立完善的實(shí)驗(yàn)考核機(jī)制
關(guān)鍵詞：檢測(cè)；學(xué)習(xí)教學(xué)
一、改革的方法
（1）基本理論和技能的訓(xùn)練基地的建立。重點(diǎn)訓(xùn)練生化檢駐技術(shù)、免疫檢驗(yàn)技術(shù)、血液檢驗(yàn)技術(shù)、細(xì)胞檢驗(yàn)技術(shù)、徽生物檢驗(yàn)技術(shù)等不僅每所教學(xué)醫(yī)院有帶教教師，還由檢驗(yàn)系選派基礎(chǔ)理論和基本技能扎實(shí)的青年教師帶教（彌補(bǔ)各醫(yī)院帶教教師理論知識(shí)的不足），隨時(shí)解決實(shí)習(xí)中所遇到的理論和技術(shù)方面的問(wèn)題聯(lián)系實(shí)際，及時(shí)，記憶深刻，易消化課堂知識(shí)。強(qiáng)化專業(yè)各學(xué)科基礎(chǔ)理論和基本技能，按教學(xué)計(jì)劃開(kāi)展各學(xué)科專題講座（不少于80學(xué)時(shí)），參加各種國(guó)際、國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議。見(jiàn)多識(shí)廣，熟悉國(guó)內(nèi)現(xiàn)有較新、精、先連儀器的原理，掌握使用方法，學(xué)會(huì)診斷程亭，設(shè)計(jì)小型畢業(yè)科研課題，完成論文。由于各教學(xué)醫(yī)院帶教教師認(rèn)真負(fù)責(zé)。
（2）外語(yǔ)能力訓(xùn)練的課程建設(shè)。除學(xué)習(xí)基礎(chǔ)外，增設(shè)醫(yī)學(xué)英語(yǔ)12時(shí)（使用六年制的英語(yǔ)教材）編寫(xiě)了《免疫學(xué)基礎(chǔ)》、《免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》（英語(yǔ)教材），開(kāi)沒(méi)丁《免痙學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)》的英語(yǔ)專業(yè)授課的新課程. 共計(jì)108學(xué)時(shí)填補(bǔ)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)本科生的專業(yè)課用英語(yǔ)講授的空自。大大提高了學(xué)生的寫(xiě)、聽(tīng)、閱讀、說(shuō)和水平，使補(bǔ)語(yǔ)能力增強(qiáng)，摸索出一套外語(yǔ)教學(xué)的方法，促進(jìn)了教學(xué)水平的提高，培養(yǎng)出專業(yè)英語(yǔ)教師。為臨床實(shí)習(xí)及文獻(xiàn)查閱、綜述撰寫(xiě)打下良好基礎(chǔ)。
（3）科研能力的訓(xùn)練及課程建設(shè)?？蒲心芰κ欠浅Ｖ匾哪芰ε囵B(yǎng)內(nèi)容，是完成培養(yǎng)目標(biāo)的關(guān)鍵。我們編寫(xiě)了《簡(jiǎn)明科學(xué)學(xué)》（即將出版），設(shè)置《科學(xué)學(xué)》課程（54學(xué)時(shí)，包括科研實(shí)踐）和《文獻(xiàn)檢索》課程（2O學(xué)時(shí)）較系統(tǒng)學(xué)習(xí)了現(xiàn)代科學(xué)學(xué)的理論，了解邊緣學(xué)科、橫向?qū)W科、綜合學(xué)科的相互聯(lián)系和科學(xué)學(xué)體系、發(fā)展趨勢(shì)，基本掌握科研方法和文獻(xiàn)查閱的途徑重點(diǎn)實(shí)施科研實(shí)踐。通過(guò)《文獻(xiàn)檢索》、《科學(xué)學(xué)》的學(xué)習(xí)，理論聯(lián)系實(shí)際。其步驟是，2～4名學(xué)生由一位具中級(jí)以上職稱的中青年教師指導(dǎo)。導(dǎo)師（其中有碩士、博士或留國(guó)研修生）有較強(qiáng)專業(yè)能力，年富力強(qiáng)勇于刨新，常是省級(jí)以上課題的負(fù)責(zé)人或?qū)W科骨干。指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行文獻(xiàn)資料的查閱、選擇綜違的立飚及綜述撰寫(xiě)（30篇左右，外文不少于I5篇），最后評(píng)價(jià)綜述和答辯《科學(xué)學(xué)》和《文獻(xiàn)檢索撇為限定選修課進(jìn)行考棱。綜述答辯做為科研實(shí)踐能力檢測(cè)方式?？己嗽u(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)由立題、前言、標(biāo)題、結(jié)論、文獻(xiàn)量、科學(xué)性、價(jià)值、表達(dá)能力、應(yīng)變能力、綜合能力等指標(biāo)組成，將成績(jī)做為畢業(yè)成績(jī)之一。科研實(shí)踐的延伸是在畢業(yè)實(shí)習(xí)中完成的，為畢業(yè)成績(jī)另一部分。學(xué)生以綜述為“背景，根據(jù)實(shí)習(xí)基地條件，修訂方案，設(shè)計(jì)較易完成的科研小課題。待實(shí)習(xí)結(jié)束，完成論文，答辯通過(guò)。
二、改革的初步效果
總的看來(lái)（分析88～90級(jí)3屆學(xué)生），從培養(yǎng)基本技能、能力和科研能力入手，進(jìn)行教學(xué)改革初顯成效表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面基礎(chǔ)理論和基本技術(shù)進(jìn)一步鞏固，基礎(chǔ)扎實(shí)。兩處實(shí)習(xí)基地反映一致，認(rèn)為學(xué)生手技較好，操作熟練，接受力強(qiáng)。愛(ài)提同，積極參加教學(xué)與科研活動(dòng)，理論知識(shí)掌握較牢。從實(shí)習(xí)評(píng)分表和評(píng)語(yǔ)”中看到，幾屆學(xué)生平均成績(jī)達(dá)到良好，并呈提高趨勢(shì)。畢業(yè)成績(jī)（科研實(shí)踐、畢業(yè)論文、畢業(yè)專業(yè)考試）較好，提高明顯的為科研實(shí)踐的綜述答辯成績(jī)（平均8O分以上），畢業(yè)論文成績(jī)參差不齊（或有的由于醫(yī)院條件的限制而缺少）影響總成績(jī)。實(shí)習(xí)學(xué)生受到各實(shí)習(xí)醫(yī)院好評(píng)，特別以醫(yī)院教授評(píng)價(jià)為代表，他認(rèn)為，我院學(xué)生學(xué)習(xí)態(tài)度端正，肯鉆研，能吃苦，基本技能較好，有后勁。平均兩年為醫(yī)院輸送1名畢業(yè)生。近三年來(lái)已先后有三十多名學(xué)生分配到各大醫(yī)院及醫(yī)療衛(wèi)生部門(mén)外語(yǔ)水平穩(wěn)步提高四、六緞考試通過(guò)宰連年提高（這對(duì)生源較多的情況是不易的）。在實(shí)習(xí)醫(yī)院科研過(guò)程，了大量的文獻(xiàn)資料和儀器使用說(shuō)明書(shū)，受到帶教教師的好評(píng)。已有綜述在省級(jí)以上雜志發(fā)表（6篇）。與國(guó)內(nèi)重點(diǎn)院校檢驗(yàn)專業(yè)的外語(yǔ)差距有所減小，其中，外語(yǔ)水平較高者已留校任教，充實(shí)教學(xué)第一線。
科研能力大大增強(qiáng)。鐵路中心醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)醫(yī)師（我院畢業(yè)生），首次發(fā)現(xiàn)新菌種，以其名命名，破格晉升。參加和參與科研工作的人數(shù)增多其中參加項(xiàng)目有的已通過(guò)省級(jí)鑒定或獲得專利和獎(jiǎng)勵(lì)。開(kāi)始在各醫(yī)院的檢驗(yàn)專業(yè)中嶄露頭角。綜合培養(yǎng)使能力提高，有的巳成為學(xué)科組組長(zhǎng)，或?qū)W科帶頭人的培養(yǎng)對(duì)象，做為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)事業(yè)的后備力量，有的向更高的層次（博士生）選取（第一個(gè)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)博士生為我院畢業(yè)生）。
三、改革的體會(huì)
（1）基本技能、外語(yǔ)能力、科研能力三位一體的訓(xùn)練方式是打破傳統(tǒng)臨床實(shí)習(xí)教學(xué)模式的行之有效的改革方法。具有醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)臨床實(shí)習(xí)特點(diǎn)（突出臨床實(shí)踐與綜違論文相聯(lián)系的特性）。雖然科研課題小，但包含了科全過(guò)程，使學(xué)生綜合能力得到鍛煉與提高
（2）臨床實(shí)習(xí)教學(xué)改革不僅體現(xiàn)在畢業(yè)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)上。還需提前到專業(yè)課（專業(yè)課）和課間實(shí)習(xí)中。使臨床實(shí)習(xí)教學(xué)改革具有系統(tǒng)性。
慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）簡(jiǎn)稱“慢淋”，是一種淋巴細(xì)胞克隆性增殖的腫瘤性疾病，主要表現(xiàn)為形態(tài)上成熟的小淋巴細(xì)胞侵襲外周血、骨髓、淋巴結(jié)和脾臟等淋巴組織。本病好發(fā)于60歲以上的老年人，且男性高于女性。本病特殊之處在于骨髓及外周血中幼稚淋巴比例明顯高于慢淋形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)2008版WHO分型方案，骨髓或外周血中腫瘤性前驅(qū)淋巴細(xì)胞（原始、幼稚淋巴）比例≥20％，并能排除母細(xì)胞性淋巴瘤浸潤(rùn)骨髓的可能，則診斷為急性淋巴細(xì)胞白血病（ALL）。如果此例病例，僅僅從形態(tài)學(xué)角度去分析判斷，就會(huì)導(dǎo)致誤診。由于對(duì)于ALL與CLL的治療方案截然不同。誤診將給患者帶來(lái)巨大的損失。因此為了準(zhǔn)確診斷，減少誤診率。需要結(jié)合形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)診斷體系，做出綜合判斷。
1資料與方法
1．1一般資料
73歲男患者，因“體質(zhì)量下降1＋月，頭昏、乏力10＋天”入院。近1＋月前患者無(wú)明顯誘因出現(xiàn)體質(zhì)量下降（約7kg），無(wú)發(fā)熱、咳嗽，無(wú)多飲、多食、多尿，未予重視。10＋天前出現(xiàn)頭昏、乏力，伴雙下肢浮腫，無(wú)頭疼、惡心、嘔吐，無(wú)皮膚黏膜出血，無(wú)腹痛、腹瀉、黑便，無(wú)心悸、氣促及呼吸困難，為診治就診本院門(mén)診，查血常規(guī)提示：白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）117．93×109／L、淋巴細(xì)胞114．39×109／L、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）1．16×1012／L、血紅蛋白（HGB）36g／L、血小板計(jì)數(shù)（PLT）70×109／L；以貧血原因?yàn)榧毙园籽∈杖氡驹貉嚎??；颊呔瘛嬍城芳眩呱锌?，二便正常，體質(zhì)量減輕約7kg。既往史：發(fā)現(xiàn)高血壓5年，未規(guī)律口服降壓藥；2年前于遵義市人民醫(yī)院行鼻竇炎手術(shù)；無(wú)遺傳病、傳染病史，無(wú)重大外傷、輸血史，無(wú)食物及藥物過(guò)敏史。患者入院后完善相應(yīng)檢查項(xiàng)目。查體：貧血貌，全身皮膚無(wú)黃染，左頸前、雙側(cè)鎖骨上、雙側(cè)腋窩、雙側(cè)腹股溝觸及數(shù)枚花生米至核桃大小的淋巴結(jié)，質(zhì)韌可活動(dòng)無(wú)壓痛。肝脾肋下未觸及，各生理反射存在，病理征陰性。輔查：鐵蛋白475．2μg／L；腎功（尿素，10．61mmol／L；尿酸，661μmol／L）。網(wǎng)織紅細(xì)胞、肝功未見(jiàn)異常。乙型肝炎五項(xiàng)、人類免疫缺陷病毒（HIV）＋梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（TPPA）＋丙型肝炎測(cè)定均未見(jiàn)異常。血型鑒定：B型Rh陽(yáng)性。骨髓象：有核細(xì)胞增生活躍，粒系增生明顯受抑，紅系分類未見(jiàn)幼紅細(xì)胞，淋巴分類，幼稚淋巴占24％，該類細(xì)胞多呈圓或橢圓形，漿量偏少，淺藍(lán)色，偶有瘤狀突起或邊緣不齊；核染色質(zhì)粗細(xì)不一，較致密，部分核仁較大，1～2個(gè)不等。外周血：白細(xì)胞數(shù)量明顯增高，分類幼淋占18％。骨穿結(jié)論：骨髓、血象幼淋分別占24％、18％，請(qǐng)臨床結(jié)合其他檢查綜合考慮。白血病免疫分型檢測(cè)結(jié)果：在CD45／SSC散點(diǎn)圖上，可見(jiàn)淋巴細(xì)胞群Lym，占有核細(xì)胞96．98％，主要表達(dá)CD2、CD20、HLA－DR、CD22、CD7、CD4、CD23、CD19、CD5、cCD79a、Kappa，弱表達(dá)CD13，不表達(dá)FMC－7、Lambda；提示慢性B淋巴細(xì)胞白血?。˙－CLL）。
1．2治療方案
入院后予輸紅細(xì)胞糾正貧血，羥基脲膠囊抑制細(xì)胞數(shù)，別嘌醇片抑制尿酸形成，碳酸氫鈉注射液促進(jìn)尿酸排泄，0．9％氯化鈉注射液、葡萄糖注射液及混合糖電解質(zhì)營(yíng)養(yǎng)支持，監(jiān)測(cè)血壓等治療。
1．3出院情況及診斷
患者未訴特殊不適，精神飲食及睡眠尚可，大小便如常。查體，生命體征平穩(wěn)，貧血貌，心臟聽(tīng)診無(wú)病理性雜音。腹部平坦無(wú)壓痛。復(fù)查血常規(guī)提示W(wǎng)BC89．78×109／L、淋巴細(xì)胞80．80×109／L、RBC2．27×1012／L、HGB66．0g／L、PLT49×109／L。明確診斷：（1）CLL（B細(xì)胞性Ⅳ期）；（2）原發(fā)性高血壓（1級(jí)中危險(xiǎn)組）；（3）高尿酸血癥。反復(fù)溝通后，患者及家屬堅(jiān)決拒絕化療并要求出院，經(jīng)上級(jí)醫(yī)生討論后予以批準(zhǔn)出院。
2討論
該患者的年齡、性別、外周血細(xì)胞及淋巴細(xì)胞百分比均符合慢淋特征，結(jié)合臨床有乏力、消瘦、食欲下降等表現(xiàn)，并且伴有多處的淋巴結(jié)進(jìn)行性腫大及貧血表現(xiàn)。與常見(jiàn)的慢淋不同之處在于，通常慢淋骨髓及外周血均以成熟階段淋巴細(xì)胞增高為主，原始和幼稚淋巴少見(jiàn)，常＜5％，而該患者骨髓及外周血幼稚淋巴比例分別達(dá)到了24％、18％，形態(tài)如骨髓象中描述（圖1見(jiàn)《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”）。幼稚淋巴比例的增高將可能導(dǎo)致預(yù)后不良。有報(bào)道慢性淋巴細(xì)胞白血病患者骨髓涂片中幼稚淋巴細(xì)胞≥5％的患者預(yù)后，較幼稚淋巴細(xì)胞5％的患者差。該特殊病例的診斷就需要與幾種淋巴細(xì)胞增高的疾病進(jìn)行鑒別了。例如ALL是由于原始及幼稚淋巴細(xì)胞在造血組織異常增殖并浸潤(rùn)各組織臟器的一種造血系統(tǒng)惡性克隆性疾病。發(fā)病可在任何年齡，但多見(jiàn)于兒童及青壯年。臨床起病急，有發(fā)熱貧血，皮膚黏膜及內(nèi)臟出血，全身淋巴結(jié)腫大，關(guān)節(jié)疼痛及胸骨壓痛較明顯。WBC多數(shù)增高，骨髓及外周血均以原始幼稚淋巴細(xì)胞增高為主，可高達(dá)90％以上。白血病細(xì)胞形態(tài)大小不一，核漿比較高，核形圓形或不規(guī)則，染色質(zhì)情況各異，核仁可有或無(wú)。退化細(xì)胞明顯增多，涂抹細(xì)胞多見(jiàn)，是ALL特征之一。幼淋巴細(xì)胞白血病（PLL）是一種特殊類型的淋巴細(xì)胞白血病。一般認(rèn)為屬于罕見(jiàn)的CLL變異型，也有人認(rèn)為是急淋的一種亞型。本病病程較CLL為短，好發(fā)于60歲以上的老年人，男性居多。臨床起病緩慢，可無(wú)明顯自覺(jué)癥狀。部分病例可因消瘦、盜汗、乏力及上腹部不適而就診。其特征是高白細(xì)胞血癥、外周血中幼稚淋巴細(xì)胞占55％以上及脾大。而核仁大呈泡狀，大而顯著且多為單個(gè)的核仁是幼淋巴細(xì)胞白血病的突出特征。
以上幾種白血病的診斷單從形態(tài)學(xué)方面，筆者的依據(jù)是原始幼稚細(xì)胞比例及各自的形態(tài)上的細(xì)微差別。由于淋巴細(xì)胞在染色上的特殊性，染色時(shí)間長(zhǎng)短的控制，對(duì)淋巴細(xì)胞成熟度的判斷影響較大。而不同的檢驗(yàn)人員由于經(jīng)驗(yàn)的差異，對(duì)淋巴細(xì)胞幼稚與成熟的判斷標(biāo)準(zhǔn)也會(huì)有差異性。因此由于形態(tài)學(xué)自身的局限性，對(duì)于這樣一些極為相似的疾病，在鑒別及診斷上有一定的難度，拿捏不準(zhǔn)就會(huì)導(dǎo)致誤診。這就需要借助流式細(xì)胞素、染色體等其他檢測(cè)手段來(lái)綜合診斷。流式細(xì)胞術(shù)目前用于CLL的診斷和鑒別診斷主要參考Moreau等提出的免疫表型積分系統(tǒng)，該患者免疫表型表達(dá)CD20、CD22、CD23、CD19等成熟B淋巴細(xì)胞標(biāo)志，特別是CD23抗原表達(dá)陽(yáng)性，積1分；免疫球蛋白輕鏈限制性地表達(dá)Kappa、不表達(dá)Lambda，積1分，提示為成熟B淋巴增殖性疾病（B－LPD）；最具特征的是同時(shí)表達(dá)T細(xì)胞抗原CD5，積1分；不表達(dá)FMC－7，積1分。典型CLL積4～5分，而該患者共計(jì)積分為4分，符合典型CLL免疫表型特點(diǎn)（見(jiàn)《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”）。而B(niǎo)細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞白血病（Bcell－prolymphocyticleukemia，B－PLL）典型免疫表型為：膜表面免疫球蛋白（SmIg）強(qiáng)陽(yáng)性（IgM或IgD），CD19、CD20、CD22、CD24、CD79b、FMc7等B細(xì)胞抗原至少1項(xiàng)以上陽(yáng)性，CD10常陰性，部分患者CD23、CD5陽(yáng)性。ALL免疫表型中一般會(huì)有CD34和（或）CD10的表達(dá)，該患者均無(wú)，故不考慮ALL。
該患者利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)是非常典型CLL，而僅靠細(xì)胞形態(tài)觀察分析，很容易誤診為幼淋巴細(xì)胞白血病和ALL。因此，綜合利用白血病形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)診斷技術(shù)體系，更能揭示白血病細(xì)胞的生物學(xué)本質(zhì)，有利于對(duì)白血病準(zhǔn)確診斷分析、設(shè)計(jì)相應(yīng)的治療方案和判斷其預(yù)后情況。
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論文摘要：隨著科技發(fā)展和人們生活水平的提高，食品安全和衛(wèi)生已經(jīng)成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。近年來(lái)國(guó)際衛(wèi)生組織非常關(guān)注食品微生物污染問(wèn)題，食品微生物檢驗(yàn)成為了食品質(zhì)量安全控制方面的重要技術(shù)之一，對(duì)控制微生物引起的食源性疾病具有重要作用。本文從分析食品微生物檢驗(yàn)應(yīng)注意的問(wèn)題入手，來(lái)探討食品微生物檢驗(yàn)的內(nèi)容和技術(shù)，為食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展做出貢獻(xiàn)。
一、食品微生物檢驗(yàn)應(yīng)注意的問(wèn)題
1、操作人員的選用和操作要求
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)聘請(qǐng)具有一定微生物學(xué)資質(zhì)的人來(lái)操作，并且要經(jīng)過(guò)考核合格后方能上崗。要求其具有較熟練的操作技能，強(qiáng)烈的質(zhì)量意識(shí)，并且嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，減少人為因素帶來(lái)的困擾。
操作要求：(1)操作人員牢記無(wú)菌觀念，整個(gè)過(guò)程要求無(wú)菌操作，嚴(yán)格按照 GB／T4789食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。(2)用無(wú)菌工具無(wú)菌操作取樣。(3)按照 GB／T4789標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2、設(shè)施設(shè)備的放置環(huán)境
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)具有適宜微生物檢驗(yàn)進(jìn)行的設(shè)施設(shè)備條件，包括檢測(cè)設(shè)施及輔助設(shè)施，并且要特別注意特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。
3、各種設(shè)備及藥品的正確配置
(1)培養(yǎng)箱、水浴鍋 、于熱滅菌箱和高壓滅菌鍋的安裝要求：①在首次安裝時(shí)要校對(duì)溫度的穩(wěn)定性和一致性。②記錄以上設(shè)施其溫度穩(wěn)定性達(dá)到平衡時(shí)所需要的時(shí)間。③要求定期對(duì)以上設(shè)備進(jìn)行清潔和消毒。④最好是使用感應(yīng)器來(lái)對(duì)運(yùn)轉(zhuǎn)循環(huán)情況進(jìn)行控制和監(jiān)控。
(2)藥品配置：①培養(yǎng)基采用高壓濕熱滅菌法，121℃滅菌15分鐘。②部分培養(yǎng)基如膽硫乳培養(yǎng)基則需采用煮沸滅菌法。③對(duì)于熱敏感的培養(yǎng)基采用膜過(guò)濾法。
4、樣品的采集、運(yùn)輸和保存
采集具有代表性的樣品，并且樣品采集必須在無(wú)菌操作下進(jìn)行，以防止樣品受到外源性污染和細(xì)菌的生長(zhǎng)。采樣用具及包裝物必須是滅菌的。在樣品的運(yùn)輸和保存過(guò)程中應(yīng)避免日光照射，防止外來(lái)物的污染。采樣后，應(yīng)將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保持樣品完整。一般不應(yīng)超過(guò)3小時(shí)。如不能及時(shí)運(yùn)送，應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存。
二、食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容和技術(shù)
食品微生物檢驗(yàn)的內(nèi)容有以下幾類 ：
1、對(duì)食品污染程度指示菌的檢驗(yàn)。(1)細(xì)菌總數(shù)又被稱為菌落總數(shù)，指食品及生活飲用水檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，所得 1g或1mc檢樣中所含細(xì)菌菌落個(gè)數(shù)，是判斷食品及生活飲用水被污染程度的重要指標(biāo)。(2)大腸菌群系指一群在37℃培養(yǎng)24h后能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)配、產(chǎn)氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏染色陰性無(wú)芽孢桿菌。其主要來(lái)源于人和牲畜的糞便，所以研究中經(jīng)常采用糞便污染指標(biāo)菌來(lái)評(píng)價(jià)生活飲用水及食品的衛(wèi)生質(zhì)量。
2、對(duì)食品中致病菌的檢測(cè)。在GB4789食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中，已明確規(guī)定某些微生物的數(shù)量，所以我們除要檢測(cè)食品污染程度指示菌，如菌落總數(shù)、大腸菌群(MPN)的測(cè)定外，還有致病菌如金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和志賀氏菌等。
食品微生物檢驗(yàn)的技術(shù)
多年以來(lái)，對(duì)食品微生物的檢測(cè)，通常采用瓊脂平板培養(yǎng)法，共需2—3d才能完成。近幾年各國(guó)的許多機(jī)構(gòu)和學(xué)者都致力于快速檢測(cè)技術(shù)和方法的研究，已改進(jìn)和開(kāi)發(fā)了一些快速的檢測(cè)技術(shù)和方法，提高了食品微生物檢驗(yàn)的高效性、準(zhǔn)確性和可靠性，其中新方法有以下幾種。
1、采用電阻抗法。其原理是細(xì)菌在培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中，將會(huì)使培養(yǎng)基中的火分電惰性物質(zhì)如碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂類等，代謝為具有電活性的小分子物質(zhì)，其能增加培養(yǎng)基的導(dǎo)電性，從而使阻抗發(fā)生變化，所以我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基的電阻抗變化情況來(lái)判定細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)繁殖特性，即可檢測(cè)出相應(yīng)的細(xì)菌。該法已用于霉菌、大腸桿菌等細(xì)菌的檢測(cè)。
2、采用快速酶觸反應(yīng)及代謝產(chǎn)物的檢測(cè)。細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中可合成和釋放某些特異性的酶，所以根據(jù)其特性來(lái)選用相對(duì)應(yīng)的底物和指示劑，并記錄反應(yīng)的結(jié)果。如美國(guó)3MPetiffilmTM微生物測(cè)試片可分別快速測(cè)定細(xì)菌總數(shù)、金黃色葡萄球菌等。
3、采用分子生物學(xué)技術(shù)。其又包括兩種技術(shù)：(1)核酸探針技術(shù)。根據(jù)堿基互補(bǔ)的原則，用特定的方法測(cè)定標(biāo)記物。(2)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)技術(shù)。其原理為通過(guò)加熱使雙鏈 DNA經(jīng)裂解成兩條單鏈，成為引物和 DNA聚合酶的模板；然后降低溫度，使寡聚核苷酸引物與 DNA分子上的互補(bǔ)序列退火。一般情況下退火溫度越高，擴(kuò)增特異性越好。
4、采用免疫學(xué)方法檢測(cè)細(xì)菌抗原和抗體的技術(shù)。其有三種技術(shù)：(1)熒光抗體檢測(cè)技術(shù) (IFA)，包括直接法和間接法。直接熒光抗體檢測(cè)法是在檢樣上直接滴加已知特異性熒光標(biāo)記的抗血清，經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。間接法是在檢樣上滴加已知細(xì)菌特異性抗血清，待作用后經(jīng)洗滌，再加入熒光標(biāo)記的抗體后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。(2)免疫酶技術(shù) (EIA)，其是將抗原、抗體特異性反應(yīng)和酶的高效催化作用原理結(jié)合，是一種新穎且實(shí)用的免疫學(xué)分析技術(shù)。通過(guò)共價(jià)結(jié)合將酶與抗原或抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)抗原或抗體，或通過(guò)免疫方法使酶與抗酶抗體結(jié)合，形成酶抗體復(fù)合物。(3)免疫磁珠分離法 (IMS)，即應(yīng)用抗體包被的免疫磁珠，用一個(gè)磁場(chǎng)裝置收集鐵珠。
5、采用儀器法。(1)微型全自動(dòng)熒光酶標(biāo)分析儀(Mini—VIDAS)，其主要采用具有優(yōu)異的敏感性和特異性的酶聯(lián)熒光技術(shù)(ELFA)，所測(cè)的熒光與抗體中抗原的含量成正比。(2)全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng) (Vietk—AMS)。其可以同時(shí)對(duì)60-~480個(gè)樣品進(jìn)行分析，并且鑒定時(shí)間只需 2～3h，這是效率非常高的一個(gè)檢驗(yàn)系統(tǒng)，并且也是今后食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展的一個(gè)方向。
三、總結(jié)
總而言之，我們?cè)趯?duì)食品微生物檢驗(yàn)時(shí)要遵守職業(yè)道德，嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)態(tài)度，注意各個(gè)環(huán)節(jié)來(lái)確保微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，為食品衛(wèi)生和安全提供可靠的依據(jù)。并且隨著現(xiàn)代技術(shù)的發(fā)展，今后食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展方向會(huì)是：(1)采用快速和大批量的檢驗(yàn)方法，來(lái)提高檢驗(yàn)效率；(2)形成標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)條件；(3)提高和保證檢驗(yàn)的精度和靈敏度。
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【摘要】目的從免疫學(xué)角度及性激素分泌角度探討CD8+CD28+/CD8+CD28-T（殺傷性/抑制性）T細(xì)胞平衡與原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者的關(guān)系。方法收集原發(fā)性垂體促性腺功能低下導(dǎo)致原發(fā)性閉經(jīng)患者32例，選取同齡段健康女性32例作為對(duì)照組，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD8+CD28+ 及CD8+CD28- T細(xì)胞及其胞內(nèi)細(xì)胞因子γ干擾素(IFN-γ)及白介素2(IL-2）的百分含量；采用放射免疫法檢測(cè)血漿雌二醇(E2)、睪酮(Tor)、卵泡刺激素(FSH)及黃體生成素(LH)含量并分析以上幾者的相關(guān)性。結(jié)果① 性激素指標(biāo)：與健康組比較，原發(fā)性閉經(jīng)組患者的E2顯著降低(P=0.000)，而Tor及LH則顯著高于健康組(P=0.008及0.010)，但兩組的FSH無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.066)。②T細(xì)胞平衡：原發(fā)性閉經(jīng)者的CD8+CD28+ T細(xì)胞及IFN-γ顯著低于健康組，但CD8+CD28- T細(xì)胞及IL-4顯著高于健康組，以上差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。③相關(guān)性分析：CD8+CD28+T細(xì)胞與CD8+CD28-T細(xì)胞呈顯著負(fù)相關(guān)性（P=0.000）；CD8+CD28-T細(xì)胞與Tor及LH呈正相關(guān)性（P=0.023，0.016）。結(jié)論原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者的免疫平衡向CD8+CD28-抑制T細(xì)胞傾斜（導(dǎo)致過(guò)度免疫抑制），該細(xì)胞數(shù)量的升高與睪酮及促黃體生成素含量增加有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】原發(fā)性閉經(jīng) T細(xì)胞平衡 性激素 相關(guān)性
doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2014.07.010
國(guó)外報(bào)道原發(fā)性閉經(jīng)患病率約為5%～10%；國(guó)內(nèi)有資料顯示原發(fā)性閉經(jīng)發(fā)病率逐年上升，已達(dá)10%左右，其中25歲以下患者比例達(dá)25%［1］；且國(guó)內(nèi)外均發(fā)現(xiàn)原發(fā)性閉經(jīng)都有發(fā)病年輕化的傾向［2］。因此原發(fā)性閉經(jīng)的病因及發(fā)病機(jī)制有待進(jìn)一步研究。已有研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性閉經(jīng)患者的CD8+T亞群數(shù)量明顯升高［3-4］，且升高的程度與血清總睪酮(Tor)及雌二醇(E2)的水平含量呈相關(guān)性，這說(shuō)明CD8+T亞群與原發(fā)性閉經(jīng)患者的性激素代謝有密切關(guān)系。但CD8+T細(xì)胞分為CD8+CD28+殺傷性及CD8+CD28-抑制性兩個(gè)亞群，且兩者構(gòu)成一個(gè)平衡，究竟原發(fā)性閉經(jīng)與該平衡關(guān)系如何，與且該平衡與性激素是否存在相關(guān)性？目前均缺乏探討。以此為創(chuàng)新點(diǎn)，筆者對(duì)原發(fā)性垂體促性腺功能低下導(dǎo)致閉經(jīng)的患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)該類患者外周血CD8+CD28-抑制T細(xì)胞含量升高，后者與睪酮及促黃體生成素含量呈相關(guān)性，具體過(guò)程如下。
1資料與方法
1.1患者資料
選取2009年1月~2011年1月間我院婦產(chǎn)科的原發(fā)性閉經(jīng)患者作為觀察對(duì)象。采用國(guó)際原發(fā)性閉經(jīng)協(xié)作組結(jié)合2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分所推薦的診斷方案及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，共入選原發(fā)性垂體促性腺功能低下導(dǎo)致閉經(jīng)的患者32例，并選取32名同齡的健康女性作為對(duì)照組，兩組的年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
1.2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
以上觀察對(duì)象均于清晨空腹抽取肘靜脈血［5］，隨后使用Beckman Coulter Cell 多色流式細(xì)胞儀，分別檢測(cè)CD28分別為陽(yáng)性及陰性的CD8+ T所占的百分比，分別代表CD8+CD28+殺傷性T細(xì)胞及CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞的數(shù)量；同法采用多色流式細(xì)胞儀，檢測(cè)以上兩類細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ及IL-4的百分的含量［6］。
1.3性激素水平測(cè)定
使用放射免疫法檢測(cè)外周血清E2、Tor、FSH及LH含量［7］。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
定量數(shù)據(jù)采用(±s)表示，兩組間同一指標(biāo)的比較采用單因素方差分析(ANOVA)檢驗(yàn)；使用Peason相關(guān)性分析法，將外周血CD8+CD28+殺傷性T細(xì)胞及CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞的數(shù)量與上述細(xì)胞因子含量及性激素含量進(jìn)行相關(guān)性分析。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件包spss 13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，當(dāng)p<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1CD8+CD28+與D8+CD28-T細(xì)胞檢測(cè)
兩組的CD8+CD28+與D8+CD28-T細(xì)胞及其細(xì)胞因子，均呈顯著梯度變化，其中CD8+CD28+T細(xì)胞及IFN-γ均以健康組含量最高，兩組之間任意兩者均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而D8+CD28-T細(xì)胞及IL-4的情況相反，以健康組最低（表1及圖1）。
2.2激素含量比較
與健康組比較，原發(fā)性閉經(jīng)組患者的E2顯著降低(P=0.000)，而Tor及LH則顯著高于健康組(P=0.008及0.010)，但兩組的FSH無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.066),見(jiàn)表2。
2.3相關(guān)性分析
通過(guò)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：①CD8+CD28+T細(xì)胞與IFN-γ呈正相關(guān)性（P=0.016）；②CD8+CD28-T細(xì)胞與IL-4、Tor及LH三者均呈正相關(guān)性（P=0.021、0.023及0.016）；③CD8+CD28+T細(xì)胞與CD8+CD28-T細(xì)胞呈顯著負(fù)相關(guān)性（P=0.000）。
3討論
CD8+T細(xì)胞是重要的T細(xì)胞亞群。根據(jù)表達(dá)細(xì)胞因子的不同，可將CD8+T細(xì)胞分為T(mén)c1及Tc2兩個(gè)亞群，其中Tc1以表達(dá)IL-2及IFN-γ為主，以介導(dǎo)細(xì)胞免疫為主；而Tc2以表達(dá)IL-4、IL-8等細(xì)胞因子為主，以介導(dǎo)體液免疫為主。本研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性垂體促性腺功能低下導(dǎo)致的原發(fā)性閉經(jīng)患者的CD8+CD28+T細(xì)胞及IFN-γ含量降低，而CD8+CD28-T細(xì)胞及IL-4含量升高，本結(jié)果與宋玉霞［8］報(bào)道的卵巢早衰(POF)患者T細(xì)胞亞群變化有類似之處；該研究發(fā)現(xiàn)卵巢早衰致閉經(jīng)患者的CD8+T細(xì)胞顯著升高，并且發(fā)現(xiàn)POF患者外周血出現(xiàn)卵巢自身抗體(AoAb)滴度升高，提示與體液免疫相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者CD8+T細(xì)胞免疫平衡向CD8+CD28-抑制性T細(xì)胞傾斜，由于IL-4屬于Tc2類細(xì)胞因子，所以該類免疫失衡屬于體液免疫性質(zhì)，與上述報(bào)道有一致性。由于體液免疫與內(nèi)分泌激素代謝存在極為重要的聯(lián)系，就兩者的聯(lián)系進(jìn)一步討論如下。
性激素是包含卵巢在內(nèi)的性腺分泌的重要蛋白質(zhì)，有研究發(fā)現(xiàn)閉經(jīng)患者血清17β-E2水平明顯下降、T明顯升高、PRL值有所下降，說(shuō)明性激素代謝紊亂是閉經(jīng)的重要表現(xiàn)［9］。由于閉經(jīng)所涉及的激素種類較多，本研究選取E2、Tor、FSH及LH作為性激素的代表進(jìn)行觀察。我們發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性閉經(jīng)組患者的E2顯著降低，而Tor及LH則顯著升高，但兩組的FSH無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這與李瀅［10］的報(bào)道的閉經(jīng)患者E2降低、LH升高大體一致。本研究結(jié)果提示該類患者雌激素水平明顯缺乏或不足，而雄激素含量升高，符合典型的閉經(jīng)患者激素代謝特征［11］；但本研究與李瀅報(bào)道有所不同的是，本研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者Tor升高，而李瀅發(fā)現(xiàn)Tor與對(duì)照組無(wú)明顯差異，可能是該研究入選的患者既包括原發(fā)性閉經(jīng)患者，又包括繼發(fā)性閉經(jīng)患者，而本研究對(duì)象均屬于原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者，這說(shuō)明了Tor可能是鑒別不同閉經(jīng)病因的重要指標(biāo)，是原發(fā)性閉經(jīng)患者的一個(gè)重要性激素代謝特征。
相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Tor及LH與CD8+CD28-T細(xì)胞及IL-4四者存在顯著正相關(guān)性，亦即表現(xiàn)為四者呈平行升高，這預(yù)示Tor及LH與閉經(jīng)患者的免疫學(xué)異常關(guān)系更為密切，故Tor及LH臨床意義更為顯著，因此我們認(rèn)為，Tor及LH的水平可以作為該類閉經(jīng)患者免疫學(xué)治療療效的重要內(nèi)分泌學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)，而IL-4可作為重要的免疫學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)。
綜合上述，本研究在一定程度上從免疫學(xué)及內(nèi)分泌學(xué)角度闡述了原發(fā)性閉經(jīng)患者免疫失衡與性激素代謝紊亂的關(guān)系，并發(fā)現(xiàn)CD8+CD28+T可能是原發(fā)性閉經(jīng)患者治療的一個(gè)靶細(xì)胞，且該類免疫失衡以Tc2類為主，其機(jī)制可能是CD8+CD28+T過(guò)度表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞抑制功能過(guò)強(qiáng)，IL-4分泌過(guò)多，間接導(dǎo)致Tor及LH過(guò)度分泌增加，導(dǎo)致內(nèi)分泌代謝紊亂，最終導(dǎo)致閉經(jīng)。以上結(jié)果可為原發(fā)性垂體促性腺功能低下閉經(jīng)患者免疫調(diào)節(jié)治療提供一定的依據(jù)，筆者將在后續(xù)的研究中進(jìn)一步該T細(xì)胞平衡與其它激素代謝的相關(guān)性。
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關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 分子診斷 應(yīng)用型實(shí)驗(yàn) 整體優(yōu)化
中圖分類號(hào)：G64 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）11（c）-0109-02
隨著科技的進(jìn)步和臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，作為臨床醫(yī)學(xué)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)間橋梁的檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)也得到了空前活躍的學(xué)科建設(shè)，其理論知識(shí)和應(yīng)用技術(shù)得到了極大的豐富和飛速發(fā)展。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是一門(mén)專業(yè)學(xué)科，一直以來(lái)就被認(rèn)為只是臨床醫(yī)學(xué)的輔助學(xué)科，而在醫(yī)院，檢驗(yàn)科也一直被認(rèn)為只是為臨床提供檢測(cè)結(jié)果的輔助科室。醫(yī)學(xué)技術(shù)在不斷創(chuàng)新，21世紀(jì)迅猛發(fā)展的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)已經(jīng)不再只是簡(jiǎn)單地進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)，而是正朝著自動(dòng)化、高效化、小型化、標(biāo)準(zhǔn)化和個(gè)體化發(fā)展，不再只是簡(jiǎn)單地為臨床提供檢測(cè)數(shù)據(jù)，而是在向著可提供臨床咨詢和參與臨床診斷和治療的檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的方向進(jìn)行轉(zhuǎn)變。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)不同于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，后者是側(cè)重于應(yīng)用技術(shù)，以標(biāo)本為中心，而前者檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)則綜合了科學(xué)、技術(shù)、臨床三方面，是以病人為中心，以疾病的診療或?yàn)樵u(píng)估人體健康程度為目的，對(duì)來(lái)自人體的材料進(jìn)行血清學(xué)、免疫學(xué)、化學(xué)、微生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)等檢驗(yàn)，并提供檢查范圍內(nèi)的醫(yī)學(xué)咨詢服務(wù)，包括對(duì)于結(jié)果的解釋和提供進(jìn)一步診療建議的學(xué)科[1]。
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)本科教育的培養(yǎng)目標(biāo)是培養(yǎng)具有寬廣扎實(shí)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)理論和專業(yè)技能，具有較強(qiáng)的臨床實(shí)踐能力和良好的臨床溝通能力，能勝任各級(jí)醫(yī)院、血站、高校及防疫部門(mén)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作的創(chuàng)新型和復(fù)合型的醫(yī)學(xué)高級(jí)專門(mén)人才[2]。20世紀(jì)50年代始，分子生物學(xué)即成為生命科學(xué)的前沿與生長(zhǎng)點(diǎn)，隨著其理論技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，分子生物學(xué)技術(shù)已逐漸成為臨床檢驗(yàn)診斷的重要手段之一，且逐步形成了“分子診斷學(xué)”這一重要的學(xué)科分支。分子診斷學(xué)是以分子生物學(xué)理論為基礎(chǔ)，利用免疫學(xué)、生化、生物信息學(xué)等多學(xué)科的理論和方法，探討疾病發(fā)生和發(fā)展的分子機(jī)制，分子診斷的前瞻性、高特異性和高靈敏度使得其臨床意義在于不僅能夠?qū)膊∽龀鲈缙谠\斷和確切診斷，而且還能確定個(gè)體的疾病易感性以及疾病分期和分型、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)后判斷以及療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)等，因此分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練就直接決定了培養(yǎng)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)生能否勝任未來(lái)的工作[3]。
1 分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)現(xiàn)狀分析
目前整體上分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的開(kāi)設(shè)情況存在以下三方面的不足：（1）教學(xué)形式單一。教學(xué)過(guò)程基本上是教師根據(jù)課本講義上的內(nèi)容進(jìn)行灌輸式講授，粉筆+黑板+口頭講授，教學(xué)方法比較簡(jiǎn)單，內(nèi)容陳舊，在學(xué)生來(lái)看，是以背書(shū)為主，較難調(diào)動(dòng)學(xué)生們學(xué)習(xí)的興趣。（2）實(shí)驗(yàn)室硬件條件相對(duì)不足。分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)在所需的硬件設(shè)施上往往需要投入的經(jīng)費(fèi)較高，加之對(duì)授課教師的分子生物學(xué)基本技術(shù)要求也較高等原因，使得實(shí)驗(yàn)教學(xué)的受重視程度不夠，最終導(dǎo)致學(xué)生的動(dòng)手能力和分析解決問(wèn)題的能力沒(méi)能得到很好的發(fā)展。（3）驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)所占比例較大。實(shí)驗(yàn)教學(xué)不僅要以培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手操作能力為目的，單純地完成一些驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，更重要的是通過(guò)加強(qiáng)專業(yè)技術(shù)訓(xùn)練，培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)思維與創(chuàng)新能力。傳統(tǒng)的分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)主要是一些基本操作技術(shù)，以驗(yàn)證理論為目的，學(xué)生機(jī)械地按已有的操作步驟進(jìn)行，缺少與其它學(xué)科的融會(huì)貫通，無(wú)法使學(xué)生形成完整的科研思路。因此，為了后續(xù)學(xué)科的學(xué)習(xí)和為培養(yǎng)適應(yīng)新世紀(jì)醫(yī)學(xué)發(fā)展要求的高級(jí)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)人才奠定良好基礎(chǔ)，使教學(xué)方法和教學(xué)內(nèi)容的運(yùn)用趨于綜合化，不斷提高學(xué)生的創(chuàng)新科學(xué)思維素質(zhì)，進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)生創(chuàng)新能力和綜合分析問(wèn)題的能力是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
2 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)的多樣化教學(xué)模
根據(jù)多年教學(xué)、科研和臨床的經(jīng)驗(yàn)，筆者認(rèn)為多樣化教學(xué)模式的開(kāi)展對(duì)于在課堂教學(xué)中培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維是非常必要的。
2.1 多媒體組合教學(xué)
醫(yī)檢專業(yè)本科教育開(kāi)設(shè)分子診斷學(xué)時(shí)間不長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)中還存在一些期待改進(jìn)的地方，其中實(shí)驗(yàn)教學(xué)軟件這方面就比較欠缺，國(guó)內(nèi)目前難以購(gòu)置較好的整體優(yōu)化的分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)多媒體課件和影像教學(xué)片，創(chuàng)作整體優(yōu)化的分子診斷學(xué)應(yīng)用型實(shí)驗(yàn)教學(xué)多媒體課件將提高分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)效果，并為暫時(shí)尚不具備條件的醫(yī)學(xué)院校開(kāi)設(shè)應(yīng)用型分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)提供較為理想的課件，提高教學(xué)效果。
多媒體組合教學(xué)就是在教學(xué)工作中運(yùn)用數(shù)碼相機(jī)、攝像機(jī)、錄像機(jī)、大屏幕投影儀以及多媒體計(jì)算機(jī)和網(wǎng)絡(luò)等進(jìn)行整體組合優(yōu)化，根據(jù)實(shí)際情況制作相應(yīng)的多媒體課件、幻燈片和電視教學(xué)片等教學(xué)軟件，在課堂上講解實(shí)驗(yàn)理論時(shí)，可以先利用多媒體視頻或動(dòng)畫(huà)等方式，為學(xué)生演示實(shí)驗(yàn)室常用儀器和器材的工作原理和規(guī)范正確的使用方法、實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)以及實(shí)驗(yàn)原理和步驟等，這樣學(xué)生可獲得直觀印象，加深對(duì)實(shí)驗(yàn)技能的理解。教師還能利用多媒體手段在課堂外，將多媒體技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)和視頻技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行多媒體網(wǎng)絡(luò)教學(xué)，向?qū)W生展示現(xiàn)代分子診斷學(xué)研究設(shè)備、新的研究技術(shù)以及受實(shí)驗(yàn)條件、學(xué)時(shí)和安全性的限制使得學(xué)生無(wú)法直接接觸到的實(shí)驗(yàn)操作，使學(xué)生能夠及時(shí)了解到分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)的最新研究手段，同時(shí)同學(xué)們還可以掌握規(guī)范正確的操作，又可在網(wǎng)絡(luò)上模擬整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和動(dòng)手操作能力，進(jìn)而達(dá)到加深學(xué)生對(duì)分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)的整體認(rèn)識(shí)和掌握常用疾病針對(duì)性實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的目的，實(shí)現(xiàn)學(xué)生與計(jì)算機(jī)的交互、學(xué)生與學(xué)生的交互、學(xué)生與老師之間的交互，大家共同學(xué)習(xí)，學(xué)習(xí)的方式和環(huán)境發(fā)生了改變，知識(shí)的傳播不再受時(shí)空的制約，并可實(shí)時(shí)進(jìn)行[4]。通過(guò)多媒體組合教學(xué)的方式，學(xué)生可以在短時(shí)間內(nèi)增加信息量，拓展知識(shí)面，開(kāi)闊眼界，從而提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效果。
2.2 分組討論
在實(shí)驗(yàn)前可設(shè)置與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的臨床問(wèn)題，引起學(xué)生的思考，帶著問(wèn)題進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中以及結(jié)束后，針對(duì)預(yù)設(shè)性問(wèn)題、實(shí)際遇到的問(wèn)題和異常的結(jié)果以小組形式展開(kāi)討論，討論不僅進(jìn)一步加強(qiáng)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、操作和結(jié)果的理解，還可加強(qiáng)學(xué)生團(tuán)結(jié)合作的意識(shí)。
2.3 雙語(yǔ)教學(xué)
根據(jù)實(shí)驗(yàn)相關(guān)內(nèi)容，結(jié)合分子診斷的最新知識(shí)和學(xué)生外語(yǔ)水平實(shí)施雙語(yǔ)教學(xué)，同時(shí)教師向?qū)W生講授查閱文獻(xiàn)的途徑、技能和方法，并引導(dǎo)學(xué)生閱讀一些有關(guān)的論文文獻(xiàn)。雙語(yǔ)教學(xué)有利于鞭策教師提高自身綜合素質(zhì)，更有利于學(xué)生提高運(yùn)用專業(yè)英語(yǔ)水平的能力，指導(dǎo)學(xué)生查閱國(guó)際最新的文獻(xiàn)資料，及時(shí)了解前沿科學(xué)技術(shù)發(fā)展情況，豐富課外科研知識(shí)。
2.4 實(shí)驗(yàn)報(bào)告論文
采用論文的形式寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，根據(jù)原理、操作步驟，結(jié)合相關(guān)理論知識(shí)和文獻(xiàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行充分論述，借以提高學(xué)生的問(wèn)題分析能力，鍛煉學(xué)生的語(yǔ)言表達(dá)能力和邏輯思維能力，并可為日后論文的撰寫(xiě)奠定基礎(chǔ)。
2.5 完善實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)性和完整性
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容主要包括分子生物學(xué)最基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及不斷加入的、隨技術(shù)發(fā)展的、能與臨床學(xué)科通匯貫通的先進(jìn)性、臨床型實(shí)驗(yàn)，以疾病為主線，以國(guó)家批準(zhǔn)的臨床常用的診斷試劑盒為材料。另外還可以將教師的科研課題結(jié)合到綜合性實(shí)驗(yàn)中，用新穎、前沿的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容激發(fā)學(xué)生的求知欲，進(jìn)一步提高學(xué)生學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)課的興趣和主動(dòng)性。經(jīng)過(guò)這些綜合性實(shí)驗(yàn)加強(qiáng)學(xué)生對(duì)各知識(shí)點(diǎn)的融會(huì)貫通，強(qiáng)化學(xué)生對(duì)整體知識(shí)的掌握。
按教學(xué)規(guī)律和大綱要求安排實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，改變傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，整體優(yōu)化選擇臨床應(yīng)用型分子診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的關(guān)鍵技術(shù)為題材。
擬為：（1）質(zhì)粒DNA的提??；（2）真核細(xì)胞DNA和mRNA的分離純化；（3）限制性內(nèi)切酶的應(yīng)用；（4）DN段的連接；（5）核酸的鑒定；（6）重組質(zhì)粒在體外的表達(dá)；（7）表達(dá)產(chǎn)物的分離和純化；（8）Western blot；（9）轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)染；（10）實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)乙肝病毒DNA；（11）實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)丙肝病毒RNA；（12）流式細(xì)胞術(shù)分析淋巴細(xì)胞亞群；（13）CD4+CD8+絕對(duì)計(jì)數(shù)；（14）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HLA-B27；（15）DNA指紋分析；（16）改良TRAP法檢測(cè)端粒酶的活性。其中核酸的分離、純化、酶切、連接、鑒定與表達(dá)是最基本的分子生物學(xué)的技能訓(xùn)練，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是臨床上用于絕對(duì)定量病患體內(nèi)微生物核酸量的最常用的方法，流式細(xì)胞術(shù)屬于臨床常用的是一種在功能水平上對(duì)生物分子進(jìn)行定量分析的檢測(cè)手段，改良TRAP法檢測(cè)端粒酶的活性是綜合性實(shí)驗(yàn)，包括提取小鼠組織DNA、勻漿、測(cè)蛋白含量、PCR、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。
3 結(jié)語(yǔ)
分子診斷技術(shù)的發(fā)展日新月異，其涉及的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和檢驗(yàn)項(xiàng)目日益增多，檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)需要密切聯(lián)系，加強(qiáng)溝通，所以針對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方面，包括教學(xué)內(nèi)容、方式以及教學(xué)意識(shí)也要進(jìn)行與時(shí)俱進(jìn)的改革，這樣才能更好地提高教學(xué)效果，培養(yǎng)出勝任和適應(yīng)現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的臨床實(shí)踐工作的創(chuàng)新型和復(fù)合型的醫(yī)學(xué)高級(jí)專門(mén)人才。
參考文獻(xiàn)
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Abstract
The paper was in order to investigate into scientific and research management and new product exploit for the new developing independent/commercial clinical laboratory.The subject construct included samples reception room， clinical biochemistry， analytical chemistry， radioimmunology， gene-based diagnostics， clinical microbiology， cytogenetics，histopathology and cytopathology， and quality control system and biological safety system，etc. In the Scientific management and education，it was established that “Kingmed Scholarship” in both cooperates university of “Central-South University” and “Chongqing Medical University” in order to training high-level personnel for scientific and technique development.
Key words
independent/commercial clinical laboratory；scientific manage；scientific and technologic exploiture
摘要： 本文對(duì)我國(guó)新興的醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室，及其科研管理與科技開(kāi)發(fā)等問(wèn)題，結(jié)合自身特點(diǎn)進(jìn)行探討與分析。本中心學(xué)科建設(shè)有：標(biāo)本接收室、臨床生化室、衛(wèi)生檢驗(yàn)室、放射免疫室、基因診斷室、臨床微生物室、細(xì)胞遺傳室、組織病理室和細(xì)胞病理室等多個(gè)學(xué)科，以及質(zhì)量控制體系、生物安全體系，在科研管理方面重視教育、培養(yǎng)人才，在科研協(xié)作大學(xué)設(shè)立“金域獎(jiǎng)學(xué)金”，為科技發(fā)展培養(yǎng)高級(jí)技術(shù)人才。
關(guān)鍵詞： 醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室；科研管理；科技開(kāi)發(fā)
隨著我國(guó)醫(yī)療制度改革的逐步深入，醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室作為醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的一個(gè)組成部分，正在我國(guó)悄然興起與穩(wěn)步發(fā)展［1］。我中心是我國(guó)具有法人資格獨(dú)立運(yùn)行的第一個(gè)醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室。中心成立于1994年，原屬?gòu)V州醫(yī)學(xué)院，從一個(gè)做保健品研發(fā)和經(jīng)營(yíng)檢驗(yàn)試劑與器材的校辦小企業(yè)，歷經(jīng)10年的發(fā)展，從開(kāi)始僅有3～4間房，幾十平方米的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所，發(fā)展到目前擁有4000m2，近300名職工，由多學(xué)科、多部門(mén)組成的一個(gè)擁有現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)科學(xué)儀器設(shè)備的、初具規(guī)模的現(xiàn)代化醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室。是國(guó)內(nèi)首家通過(guò)ISO/IEC-17025認(rèn)可和ISO9001-2000認(rèn)證。目前正沿著美國(guó)CAP（病理學(xué)家協(xié)會(huì)）認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室發(fā)展，并且按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系運(yùn)行［2］：即要有高質(zhì)量、高標(biāo)準(zhǔn)、快速、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目，同時(shí)大力開(kāi)展科學(xué)研究與科技開(kāi)發(fā)工作，不斷引進(jìn)新技術(shù)、新項(xiàng)目，擴(kuò)大檢驗(yàn)服務(wù)范圍，在競(jìng)爭(zhēng)中求生存，在生存中求發(fā)展。現(xiàn)就我醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室及其科技開(kāi)發(fā)與科研管理等進(jìn)行以下初步探索。
1 醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室組織架構(gòu)
目前，我中心以實(shí)驗(yàn)診斷部為主體，分設(shè)臨床生化室、衛(wèi)生檢驗(yàn)室、放射免疫室、基因診斷室、臨床微生物室、細(xì)胞遺傳室、組織病理室、細(xì)胞病理室、免疫組化室和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室以及質(zhì)量保證部和生物安全管理體系等多個(gè)學(xué)科。此外，中心還在北京等地建立了自己的檢驗(yàn)試劑研發(fā)與生產(chǎn)中心、健康檢查中心。開(kāi)展檢驗(yàn)項(xiàng)目達(dá)1000多項(xiàng)，為廣東省700多家基層醫(yī)院和20多家三甲醫(yī)院提供高新檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)。檢驗(yàn)項(xiàng)目和服務(wù)范圍日趨擴(kuò)大，在當(dāng)今國(guó)內(nèi)檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)行業(yè)中處于領(lǐng)先地位。
2 醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室科研管理體系
2.1 在提供檢驗(yàn)技術(shù)服務(wù)中確立科研方向 我中心是實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)的提供者，是一個(gè)高度專業(yè)性的獨(dú)立臨床實(shí)驗(yàn)室。為了滿足廣大地市級(jí)基層醫(yī)院和部分大型綜合性三甲醫(yī)院對(duì)一些特殊檢驗(yàn)項(xiàng)目測(cè)試的需求，為了實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的道路，按照國(guó)際與國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量管理體系［3，4］和國(guó)家、省、市科技發(fā)展規(guī)劃以及地區(qū)基層醫(yī)院科研工作的需要，確立自身的科研方向。
2.1.1 建立實(shí)驗(yàn)室國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量管理體系 參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）及ISO/IEC 17025要求，制定實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證和管理制度。積極參與國(guó)際（CAP）、國(guó)內(nèi)（衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心）和省內(nèi)（廣東省臨床檢驗(yàn)中心）質(zhì)量管理和質(zhì)量控制體系，在ISO/IEC-17025檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的基礎(chǔ)上［4］，創(chuàng)建美國(guó)CAP認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，建立省級(jí)生物醫(yī)藥臨床檢測(cè)試驗(yàn)基地和技術(shù)平臺(tái)為目標(biāo)。
2.1.2 檢驗(yàn)診斷試劑研發(fā) 一是在北京金域重點(diǎn)研制和開(kāi)發(fā)干化學(xué)檢驗(yàn)診斷試劑，如骨代謝（骨鈣知A/B）、尿碘、BV（細(xì)菌性陰道?。┑葖D嬰保健與健康評(píng)價(jià)快速診斷檢測(cè)試劑盒等系列產(chǎn)品；二是對(duì)目前承擔(dān)的省市科委科研項(xiàng)目及其取得的科研成果，進(jìn)行研發(fā)新的診斷試劑盒（如改良嗜肺軍團(tuán)菌BCYEα-DGVP培養(yǎng)基和乙肝耐藥基因分型檢測(cè)試劑盒等）。
2.1.3 基礎(chǔ)應(yīng)用研究 檢驗(yàn)中心通過(guò)自行研發(fā)、引進(jìn)、合作等多種途徑，運(yùn)用分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、分子病理學(xué)等最新檢驗(yàn)技術(shù)，整合先進(jìn)的診斷技術(shù)和方法，大力開(kāi)展特種檢驗(yàn)項(xiàng)目：包括分子生物學(xué)基因診斷新技術(shù)、遺傳性疾病易感基因診斷、感染性疾病病源微生物基因診斷等，為臨床提供高新檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)。
2.2 確立重點(diǎn)科研項(xiàng)目 現(xiàn)階段重點(diǎn)科研項(xiàng)目包括實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證體系研究及在ISO-IEC-17025認(rèn)可基礎(chǔ)上，創(chuàng)建美國(guó)CAP認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室和生物醫(yī)藥臨床試驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)。研發(fā)婦嬰健康評(píng)價(jià)系列診斷試劑盒、液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）設(shè)備和試劑國(guó)產(chǎn)化、廣東地區(qū)宮頸癌和癌前病變流行病學(xué)、細(xì)胞學(xué)和HPV（人瘤病毒）病因?qū)W研究等。
2.3 承擔(dān)和完成國(guó)家、省、市科技發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目 中心科研管理部門(mén)引導(dǎo)中高級(jí)科技人員，每年向省、市、區(qū)各級(jí)科研機(jī)構(gòu)申報(bào)科研項(xiàng)目。近5年來(lái)曾先后申報(bào)、承擔(dān)和完成10多項(xiàng)省、市科技發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目，創(chuàng)建了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)產(chǎn)、學(xué)、研一體化的檢驗(yàn)科技診斷技術(shù)平臺(tái)，促進(jìn)了金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科技事業(yè)的高速發(fā)展。
3 人才培養(yǎng)與科研梯隊(duì)建設(shè)
3.1 科研梯隊(duì)建設(shè) 發(fā)展科技事業(yè)必須建立一支科研隊(duì)伍，必須引進(jìn)與培養(yǎng)學(xué)科帶頭人。為此，我中心在國(guó)內(nèi)、外招聘了一批知名檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與病理學(xué)專家，組建了專家顧問(wèn)委員會(huì)，指導(dǎo)科研工作。同時(shí)招聘與引進(jìn)一批中青年科技專家，包括醫(yī)學(xué)博士、碩士研究生等高中級(jí)科技人員，組成一支老中青三結(jié)合的科研隊(duì)伍，承擔(dān)各項(xiàng)科研項(xiàng)目。
3.2 人才培養(yǎng) 金域檢驗(yàn)以廣州醫(yī)學(xué)院為依托，同時(shí)與國(guó)內(nèi)部分具有檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)的高等醫(yī)學(xué)院校，包括中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院、重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)系等密切合作，建立碩士研究生培養(yǎng)點(diǎn)，共同招收碩士研究生，培養(yǎng)中高級(jí)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)人才。我中心亦選拔各學(xué)組技術(shù)骨干和優(yōu)秀人才，外送委派培養(yǎng)博士研究生和碩士研究生，自身培養(yǎng)本專業(yè)學(xué)科帶頭人。
4 建立科技攻關(guān)與科研獎(jiǎng)勵(lì)制度
4.1 科技攻關(guān) 對(duì)于目前承擔(dān)的10多項(xiàng)省、市科委科研攻關(guān)項(xiàng)目，由老專家和學(xué)科帶頭人組織科研攻關(guān)小組，共同參與課題研究，撰寫(xiě)科研論文，組織科研成果鑒定。近2～3年來(lái)，先后開(kāi)展和完成的省、市科委科研攻關(guān)項(xiàng)目有《嗜肺軍團(tuán)菌快速診斷試劑盒研發(fā)》、《乙肝病毒拉米夫定耐藥基因快速診斷試劑盒研發(fā)》、《尿碘、骨鈣知、BV婦幼健康評(píng)價(jià)快速診斷試劑盒研發(fā)》、《中國(guó)人PLGK1-3、K5及EDN 基因工程研究》、《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)診斷試劑產(chǎn)學(xué)研一體化應(yīng)用開(kāi)發(fā)研究》等項(xiàng)目，并且取得了階段性科研成果。先后在國(guó)際、國(guó)內(nèi)10多種醫(yī)學(xué)期刊發(fā)表了60多篇科研論文，現(xiàn)正準(zhǔn)備做系列科研成果鑒定。
4.2 學(xué)術(shù)活動(dòng) 檢驗(yàn)中心積極參與國(guó)際和國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議，每年要派出5～6批科研管理人員、中青年科技專家和科技員參加國(guó)際（IFCC、APCCB）、國(guó)內(nèi)（中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)）各種學(xué)術(shù)會(huì)議，不斷提高學(xué)術(shù)水平。同時(shí)還申請(qǐng)承辦或協(xié)辦中華醫(yī)學(xué)會(huì)的一些學(xué)術(shù)會(huì)議，以及衛(wèi)生部和省衛(wèi)生廳主辦的檢驗(yàn)專業(yè)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班。近年來(lái)，中心先后承辦了中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)專業(yè)委員會(huì)《中國(guó)醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室研討會(huì)》、《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)檢驗(yàn)新技術(shù)》、《分子生物學(xué)診斷新技術(shù)》等多個(gè)學(xué)習(xí)班，并邀請(qǐng)國(guó)內(nèi)、外專家來(lái)講學(xué)班授課。
4.3 科研獎(jiǎng)勵(lì) 我中心對(duì)科技人員在國(guó)家或國(guó)際級(jí)權(quán)威雜志上發(fā)表科研論文者，不僅提供全部費(fèi)，而且給者以實(shí)際獎(jiǎng)勵(lì)。鼓勵(lì)科技人員積極參與科研工作，撰寫(xiě)科研論文，提高學(xué)術(shù)水平。
5 建立檢驗(yàn)診斷試劑產(chǎn)學(xué)研一體化研究開(kāi)發(fā)基地
我中心參照國(guó)外大型現(xiàn)代化醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)學(xué)研一體化運(yùn)行模式，集科研、教學(xué)、檢驗(yàn)、診斷、試劑產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和高科技檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)為一體，建立科研與科技開(kāi)發(fā)生產(chǎn)基地。
5.1 高科技檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù) 我中心引進(jìn)國(guó)內(nèi)外高新檢驗(yàn)診斷技術(shù)，開(kāi)展檢驗(yàn)項(xiàng)目1000多項(xiàng)，為廣東省700多家基層醫(yī)院和部分三甲醫(yī)院提供特種檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)。其特點(diǎn)：一是優(yōu)化醫(yī)療衛(wèi)生資源配置，實(shí)現(xiàn)資源共享；二是提供社區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生服務(wù)體系；三是提高檢驗(yàn)診斷技術(shù)水平，方便患者，縮小基層醫(yī)院醫(yī)生與上級(jí)醫(yī)生間診斷和科研水平上的差距，減小城鄉(xiāng)之間醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量的差別，提高整體醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)水平。病人可以實(shí)現(xiàn)就近就醫(yī)，避免因?yàn)獒t(yī)院不具備檢驗(yàn)技術(shù)而不得不轉(zhuǎn)院的麻煩。尤其是對(duì)于廣大農(nóng)村患者來(lái)說(shuō)，他們不用再專門(mén)到中心城市，也可以享受到高水平的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)服務(wù)。
5.2 建立科研與科技開(kāi)發(fā)生產(chǎn)基地 中心自身建有檢驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)基地（北京金域高科診斷技術(shù)有限公司），將科研成果直接轉(zhuǎn)化為新產(chǎn)品，進(jìn)行開(kāi)發(fā)生產(chǎn)。目前已有婦幼保健和健康評(píng)價(jià)快速診斷系列產(chǎn)品（骨鈣知、尿碘、VB快速診斷試劑盒），取得專利技術(shù)和生產(chǎn)許可證，其中有些為國(guó)內(nèi)首創(chuàng)，解決了過(guò)去對(duì)這類產(chǎn)品完全依賴進(jìn)口的難題。
5.3 通過(guò)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)診斷試劑產(chǎn)學(xué)研一體化應(yīng)用開(kāi)發(fā)系列研究 對(duì)我國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)事業(yè)的發(fā)展、對(duì)提供高新檢驗(yàn)診斷技術(shù)服務(wù)與檢驗(yàn)診斷試劑產(chǎn)學(xué)研一體化，營(yíng)造一個(gè)高新技術(shù)平臺(tái)。
6 醫(yī)學(xué)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室科技開(kāi)發(fā)的有利因素
6.1 資源共享、設(shè)備優(yōu)良 我中心現(xiàn)有全自動(dòng)生化儀、放免儀、原子吸收光譜、熒光實(shí)時(shí)定量PCR、HC2、DNA雜交儀、化學(xué)發(fā)光儀、紫外分光儀、全自動(dòng)病理組織制片系統(tǒng)、TCT檢測(cè)儀、熒光顯微鏡、多頭顯微鏡、遠(yuǎn)程病理診斷會(huì)診系統(tǒng)、全排式生物安全柜等價(jià)值1000多萬(wàn)元現(xiàn)代檢驗(yàn)儀器設(shè)備，最近又引進(jìn)了氣相和液相色譜儀、串聯(lián)質(zhì)譜儀等先進(jìn)檢驗(yàn)儀器設(shè)備。
論文摘要：目的：探討乙肝病毒前S2抗原(pre-S2Ag)的檢測(cè)及其臨床意義。方法：對(duì)188例標(biāo)本采用ELISA法進(jìn)行乙型肝炎病毒標(biāo)志物fHBV M1及pre-S2Ag檢測(cè)，并對(duì)其中162例標(biāo)本應(yīng)用熒光定量PCR法檢測(cè)HBV-DNA。結(jié)果：162例血清標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)HBV-DNA和pre-S2Ag，兩者檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=2.78，P＞0.05)。HBeAg(+)與HBeAb(+)組之間pre-S2Ag陽(yáng)性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=28.03，P＜0.005)。HBeAg(+)組、HBclgM(+)組pre-S2Ag陽(yáng)性率為100％，HBSAg(+)的肝癌組pre-S2Ag陽(yáng)性率達(dá)95.0％，結(jié)果明顯高于HBV-DNA(-)組18.4％，P值均＜0.005。結(jié)論：pre-S2Ag是反映病毒感染與復(fù)制的指標(biāo)，與臨床病情活動(dòng)有關(guān)，可作為療效和預(yù)后的觀察指標(biāo)，能完善和補(bǔ)充乙肝病毒血清標(biāo)志物的檢測(cè)。
我國(guó)是乙型肝炎病毒(HepatitiS B ViruS，HBV)感染的流行區(qū)，乙型肝炎病毒是引起病毒性肝炎最常見(jiàn)的溶血性病毒，不僅人群感染率高。而且有些HBV感染可能由于外周耐受，T細(xì)胞反應(yīng)低下、抗原呈遞抑制、選擇性免疫抑制、病毒基因表達(dá)下調(diào)或基因變異等導(dǎo)致T細(xì)胞識(shí)別障礙，容易轉(zhuǎn)為慢性感染。部分患者可演變?yōu)楦斡不踔猎l(fā)性肝癌。不同的HBV血清免疫標(biāo)志物模式提示不同的臨床意義，HBV-DNA是判定HBV感染者病毒是否復(fù)制和當(dāng)前有無(wú)傳染性的主要指標(biāo)，了解免疫學(xué)和分子生物學(xué)標(biāo)志物間的關(guān)系對(duì)臨床診斷和治療很有價(jià)值。據(jù)估計(jì)無(wú)癥狀的乙肝病毒攜帶者達(dá)1.2億，乙肝患者3000多萬(wàn)，其中15％～25％的患者將死于慢性肝病(肝癌、肝硬化)，給人類健康帶來(lái)極大危害。為了能及時(shí)、準(zhǔn)確地診斷，以指導(dǎo)治療及判斷預(yù)后，乙肝病毒的檢測(cè)指標(biāo)日益增多。文獻(xiàn)資料顯示，pre-S2Ag在乙肝HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)模式中陽(yáng)性檢出率最高，抗HBSAg(+)、抗HBe(+)、抗HBe+模式中次之，其他模式較低。本文就pre-S2Ag陽(yáng)性率與HBV-DNA、HBV M檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析，旨在探討pre-S2Ag檢測(cè)的臨床意義，現(xiàn)總結(jié)分析報(bào)道如下：
1．資料與方法
1．1標(biāo)本來(lái)源
搜集本院2006年3～12月門(mén)診和入院患者188例，其中同時(shí)檢測(cè)HBVM及HBV-DNA共162例：另外急性乙肝患者6例，乙肝表面抗原陽(yáng)性并臨床診斷為肝癌患者20例。
1．2g～試劑
HBVM、HBcIgM試劑由某有限公司提供；pre-S2Ag試劑由某市肝病試劑研究中心提供，以上均采用ELISA法檢測(cè)；HBV-DNA試劑購(gòu)自某有限公司，結(jié)果以≥500拷貝／ml為陽(yáng)性。以上操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
1．3檢測(cè)儀器
意大利希亞克(SEAC)公司的全自動(dòng)免疫分析儀一愛(ài)麗絲及HBV-DNA測(cè)定由我市人民醫(yī)院用國(guó)外羅氏公司的全自動(dòng)熒光PCR擴(kuò)增儀。
1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
分析計(jì)量資料、計(jì)數(shù)資料比較分別使用t檢驗(yàn)和x2檢驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)用SPSS10.0forWindowS統(tǒng)計(jì)軟件包處理。
2．結(jié)果
2．1pre-S2Ag與HBV-DNA及乙型肝炎病毒標(biāo)志4h(HBVM)之間的結(jié)果比較
3．討論
慢性HBV感染常對(duì)部分肝細(xì)胞有長(zhǎng)期持續(xù)性損傷，但損傷程度與HBV-DNA水平無(wú)明顯正相關(guān)，機(jī)體對(duì)HBV的免疫應(yīng)答是造成肝組織破壞及肝功能異常的主要機(jī)制。pre-S2Ag是乙肝病毒外殼中蛋白的一部分，是HBSAg肽鏈N末端前附加的55個(gè)氨基酸序列，其暴露于HBV囊膜外層，也是病毒的表面抗原。HBV-DNA是衡量乙肝病毒復(fù)制最靈敏、最精確的證據(jù)，是判斷患者有無(wú)傳染性最直接的指標(biāo)。表2中，HBV-DNA與pre-S2 Ag檢測(cè)結(jié)果采用配對(duì)資料x(chóng)2檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=2.78，P＞0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道相同。pre-S2Ag具有多聚人血清白蛋白受體(PHSA-R)，能與PH—SA結(jié)合，由于肝細(xì)胞表面也有PHSA-R，HBV能通過(guò)血循環(huán)中存在的PHSA的介導(dǎo)，吸附到肝細(xì)胞表面，最后由胞飲作用進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi)，因此，病人血清檢出pre-S2Ag表示HBV在肝細(xì)胞中復(fù)制。 轉(zhuǎn)貼于
乙肝患者血清中存在HBeAg是經(jīng)典的HBV復(fù)制及評(píng)估其傳染性的標(biāo)志物。本組資料HBeAg(+)的標(biāo)本中的pre-S2Ag陽(yáng)性率為100％，同時(shí)HBclgM(+)的急性乙肝患者pre-S2Ag檢出率為100％，同樣表明pre-S2Ag的存在和病毒復(fù)制及臨床病情活動(dòng)有關(guān)。表3中，HBeAg(+1組與HBeAbf+1組與pre-S2Ag檢出率比較(x2=28.03，P＜0.005)，說(shuō)明兩組pre-S2Ag檢出率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HBeAb(+)組pre-S2Ag陽(yáng)性率低于HBeAg(+)組，HBeAg向HBeAb轉(zhuǎn)換表示病毒復(fù)制減少，傳染性變?nèi)?，表明pre-S2Ag轉(zhuǎn)陰是病情好轉(zhuǎn)、傳染性減弱的指標(biāo)。隨著HBV-DNA(+)到HBV-DNA(-).HBeAg向HBeAb轉(zhuǎn)換的過(guò)程，其pre-S2Ag陽(yáng)性標(biāo)本吸光度(A值1均值由1.5351.0870.734逐漸降低(P＜0.05)，同時(shí)在肝癌組pre-S2Ag陽(yáng)性標(biāo)本A均值為1.362，HBcIgM(+)組pre-S2AS陽(yáng)性標(biāo)本A均值為1.305，兩疾病組proS2Ag陽(yáng)性標(biāo)本A均值也很高，表明高滴度的pre-S2Ag與病情活動(dòng)有關(guān)，而低滴度的pre-S2Ag預(yù)示HBeAg的消失或病情好轉(zhuǎn)。
[關(guān)鍵詞] 原發(fā)性肝癌；甲胎蛋白；癌胚抗原；α-L巖澡糖甘酶；γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶
[中圖分類號(hào)] R735.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）28-0103-03
原發(fā)性肝癌是我國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤之一，發(fā)病年齡中位數(shù)在40～50歲，是世界常見(jiàn)10大惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率均列居前三位，具有發(fā)展快、預(yù)后差的特點(diǎn)。早期診斷在原發(fā)性肝癌（PHC）治療顯得極其重要。迄今為止在PHC診斷的各種標(biāo)志物中敏感性尚無(wú)超過(guò)AFP者，但是我國(guó)PHC患者有10%～30%屬于AFP陰性，致使甲胎蛋白（AFP）在原發(fā)性肝癌早期診斷中，受其敏感性和特異性限制，容易造成漏診和誤診[1]。由于AFP敏感性和特異性都不能令人滿意，缺乏敏感、特異的早期診斷方法，臨床發(fā)現(xiàn)的肝癌多為晚期，總體療效甚差，5年存活率不足5%。人們?cè)诓粩嗯で蟾佑行У臉?biāo)志物及檢測(cè)方法特別是在早期診斷方面。本文對(duì)85例原發(fā)性肝癌（primary liver cancer，PHC）中血清甲胎蛋白（alpha fetal protein，AFP）、癌胚抗原（cancer embryo antigen，CEA）、α-L巖澡糖甘酶（alpha L bath sugar，AFU）、γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶（gamma glutamyl transpeptidase，GGT）進(jìn)行聯(lián)檢，探討其對(duì)PHC的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
收集我院2013年2月～2014年1月腫瘤科住院治療PHC患者85例，男52例，女33例，年齡37～71歲，平均（51.0±3.5）歲；良性肝病組選擇我院感染科、消化內(nèi)科住院患者92例，男49例，女43例，主要為肝硬化、慢性肝炎、肝占位良性變等，年齡35～69歲，平均（49.0±6.5）歲；所有病例根據(jù)臨床表現(xiàn)資料，經(jīng)各種影像學(xué)資料并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)檢測(cè)資料確診。同時(shí)選取健康體檢者100例，男53例，女47例，年齡27～67歲，平均（45.0±4.5）歲，排除肝、腎功能異常等疾病。各組患者的性別及年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
1.2 方法
1.2.1 標(biāo)本采集 所有受檢者空腹靜脈采血4 mL，注入干燥真空管內(nèi)，血液凝固后以3000 r/min分離血清，取2 mL血清置-20℃保存待檢[2]。
1.2.2 試劑與儀器 AFU、GGT檢測(cè)采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法，儀器AU5800生化分析儀及原裝配套試劑檢測(cè)，AFU、GGT正常參考值（AFU=4～54 U/L，GGT=8～85 U/L），操作參照試劑說(shuō)明書(shū)。AFP、CEA檢測(cè)采用免疫化學(xué)發(fā)光法，儀器AI2000電化學(xué)發(fā)光儀及原裝配套試劑檢測(cè)，正常值（AFP=0～10 μg/L，CEA=0～5.8 μg/L），操作參照試劑說(shuō)明書(shū)。
1.3 觀察指標(biāo)
觀察血清AFP、CEA、AFU、GGT同步檢測(cè)水平和陽(yáng)性率。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，P
2 結(jié)果
原發(fā)性肝癌組血清4種標(biāo)志物水平明顯高于良性肝病組、對(duì)照組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
表1 原發(fā)性肝癌組、良性肝病組、對(duì)照組血清中四種腫瘤標(biāo)志物
檢測(cè)（x±s）
注：AFP（t1=8.58，P=0.00，t2=15.6，P=0.00）；CEA（t1=21.1，P=0.00；t2=22.8，P=0.00）；AFU（t1=45.0，P=0.00；t2=67.4，P=0.000）；GGT（t1=14.1，P=0.00；t2=29.0，P=0.00）
3 討論
文獻(xiàn)報(bào)道原發(fā)性肝癌（PHC）是我國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤之一，常見(jiàn)癥狀肝區(qū)疼痛，全身消化道癥狀，肝腫大，肝癌轉(zhuǎn)移癥狀[3]。而HBV、HCV感染與PHC發(fā)生呈正相關(guān)，我國(guó)是病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)，防治PHC是我們面臨的一項(xiàng)重要并且極其艱巨的任務(wù)。我國(guó)患者年齡中位數(shù)40～50歲，男性比女性多見(jiàn)。其病因和發(fā)病機(jī)制尚未確定，目前認(rèn)為與肝硬化、病毒性肝炎以及黃曲霉素等化學(xué)致癌物質(zhì)和環(huán)境因素有關(guān)。但是患者的臨床癥狀一旦出現(xiàn)或影像學(xué)發(fā)現(xiàn)大部分患者已到中晚期，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是提高患者生存率的唯一方法，所以原發(fā)性肝癌早期診斷、早期治療、提高總體療效有待提高[4]。
甲胎蛋白（alpha fetal protein，AFP）是1956年Bergstrandh和Czar在人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種專一性的甲種球蛋白。1964年Ta Tarinov發(fā)現(xiàn)PHC患者血清中檢測(cè)到AFP，自此以來(lái)，作為肝癌診斷的最佳標(biāo)志物在肝癌的實(shí)驗(yàn)室診斷中，AFP是診斷肝癌特別是原發(fā)性肝細(xì)胞癌比較靈敏的指標(biāo)，具有確立診斷、早期診斷、鑒別診斷的特點(diǎn)，近年來(lái)在原發(fā)性肝細(xì)胞癌診斷中的重要性備受青睞[5]，排除妊娠和其他系統(tǒng)腫瘤，原發(fā)性肝癌的診斷即可確立[6]。部分急性肝炎患者血清中AFP測(cè)定值可以升高但是不超過(guò)300 μg/L并伴有ALT、AST等指標(biāo)的同時(shí)升高，一般在2個(gè)月內(nèi)隨病情的好轉(zhuǎn)而下降，多數(shù)不會(huì)超過(guò)2個(gè)月；同時(shí)伴有轉(zhuǎn)氨酶升高，當(dāng)轉(zhuǎn)氨酶下降后甲胎蛋白也隨之下降，血清甲胎蛋白濃度常與轉(zhuǎn)氨酶呈平行關(guān)系。如果甲胎蛋白濃度在500 μg/L以上，雖有轉(zhuǎn)氨酶升高，但肝癌的可能性大，轉(zhuǎn)氨酶下降或穩(wěn)定，而甲胎蛋白上升，也應(yīng)高度懷疑肝癌。但是小肝癌特別是直徑
本資料顯示AFP、CEA、AFU、GGT在原發(fā)性肝癌組濃度明顯高于良性肝病組和對(duì)照組，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
在健康體檢中凡是中年以上定期普查以上四項(xiàng)指標(biāo)非常必要，特別是有肝病史的患者，如有原因不明的肝區(qū)疼痛、消瘦、進(jìn)行性肝腫大者，定期普查以上四項(xiàng)指標(biāo)并聯(lián)合檢查影像學(xué)指標(biāo)，能實(shí)現(xiàn)原發(fā)性肝癌早發(fā)現(xiàn)、早治療，總體療效可以明顯提高。
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【關(guān)鍵詞】 糖尿?。活愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；臨床特點(diǎn)
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.027
糖尿病是臨床上常見(jiàn)的代謝異常綜合征， 胰島素分泌和（或）作用缺陷而引起機(jī)體代謝系統(tǒng)紊亂是主要的病理產(chǎn)生機(jī)制。近年來(lái)有研究顯示， 糖尿病與其他自身免疫性疾病存在相似的遺傳學(xué)基礎(chǔ)， 也屬于自身免疫疾病[1]， 而RA的病因尚不明確， 多數(shù)醫(yī)學(xué)專家傾向于自身免疫學(xué)說(shuō)， 糖尿病合并RA或橋本甲狀腺炎等自身免疫疾病在臨床上并不少見(jiàn)。本文針對(duì)合并RA的糖尿病患者與單純糖尿病患者進(jìn)行對(duì)比研究， 分析糖尿病并RA的臨床特征， 旨在為更有效的臨床診療工作提供參考。具體內(nèi)容整理后報(bào)告如下。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 納入2013年3月～2015年2月就診于本院的糖尿病并RA患者36例作為觀察組， 另選取同期就診的單純糖尿病患者36例作為對(duì)照組。觀察組中男19例， 女17例， 患者年齡43～76歲， 平均年齡（59.30±4.29）歲， 平均體質(zhì)量指數(shù)（24.42±4.10）kg/m2， 平均收縮壓與舒張壓分別為（130.78±26.48）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）與（75.35±
10.45）mm Hg；對(duì)照組中男21例， 女15例， 患者年齡45～78歲，
平均年齡（60.18±4.72）歲， 平均體質(zhì)量指數(shù)（25.16±3.78）kg/m2， 平均收縮壓與舒張壓分別為（139.35±28.17）mm Hg與（80.25± 11.77）mm Hg。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。所有入選患者均對(duì)本組研究?jī)?nèi)容充分知情， 均自愿入組， 在研究過(guò)程中具有較高依從性， 符合倫理學(xué)原則。
1. 2 方法 所有入選對(duì)象均入院后進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)， 包括身高、體重、血壓等， 同時(shí)禁食12 h后， 抽取清晨空腹靜脈血3 ml， 置入無(wú)菌干燥試管內(nèi)， 不予以抗凝處理；待血液凝固后再行離心并保留血清。采用全自動(dòng)生化儀對(duì)血脂血糖等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)， 主要檢測(cè)指標(biāo)包括TC、CRP、FBG、HbA1c、HDL-C、TG。
1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用spss17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
觀察組的TG、HDL-C均顯著低于對(duì)照組， 而血清CRP較對(duì)照組更高， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩組的FBG、HbA1c以及TC比較， 差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表1。
3 討論
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是臨床上常見(jiàn)的慢性進(jìn)展性自身免疫疾病， 其病理過(guò)程為關(guān)節(jié)滑膜發(fā)生炎癥， 患者以關(guān)節(jié)畸形為主要表現(xiàn)， 生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。有學(xué)者在研究中發(fā)現(xiàn)， RA患者發(fā)生心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)更高， 推斷可能與炎癥狀態(tài)引發(fā)血脂、血糖等代謝紊亂存在一定關(guān)聯(lián)[2， 3]。但現(xiàn)階段醫(yī)學(xué)界并未就RA對(duì)血脂血糖的影響達(dá)成一致認(rèn)識(shí)， RA患者并發(fā)糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)較正常人群更高， 且RA患者在高炎癥狀態(tài)下發(fā)生胰島素抵抗的幾率與低炎癥狀態(tài)患者相比更低。糖尿病是常見(jiàn)的慢性疾病， 屬于代謝紊亂型常見(jiàn)病， 患者多伴隨有不同程度的血脂紊亂， 并以TG、HDL-C下降為主要表現(xiàn)， 這些表現(xiàn)均是心血管疾病的主要誘導(dǎo)因素之一。王友蓮等[4]在研究中發(fā)現(xiàn)， RA患者在確診前的4～5年內(nèi)， 便可發(fā)現(xiàn)RA患者存在明顯的TG與HDL-C下降；而橫斷面研究則認(rèn)為RA患者確診前便可發(fā)現(xiàn)較高的TC水平；但也有報(bào)道指出， RA患者的TC與HDL-C水平均較正常組更低。RA與糖尿病患者血脂代謝的相關(guān)性仍不明確。董笑影等[5]從基因角度進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)， RA患者的血脂代謝與RA易感基因存在顯著相關(guān)性， RA患者的血脂代謝過(guò)程直接受到相關(guān)基因的調(diào)控， 可誘導(dǎo)患者發(fā)生心血管疾病等不良后果。
本組研究結(jié)果顯示， 觀察組合并RA的糖尿病患者的TG與HDL-C水平分別為（1.43±0.61）mmol/L、（1.06±0.32）mmol/L， 相較于對(duì)照組單純糖尿病患者更低， 組間對(duì)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 而FBG、HbA1c以及TC組間對(duì)比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 表明RA參與到糖尿病患者的血脂代謝過(guò)程中， 糖尿病合并RA會(huì)導(dǎo)致血脂紊亂進(jìn)一步加重而增大心血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。
但RA患者發(fā)生系統(tǒng)性炎癥與高血壓之間的關(guān)系仍不明確， 多位學(xué)者針對(duì)這一問(wèn)題進(jìn)行分析[6， 7]， 發(fā)現(xiàn)RA患者與無(wú)RA患者相比并未出現(xiàn)明顯的血壓升高。另外， RA的炎癥狀態(tài)會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)更嚴(yán)重的胰島素抵抗， 進(jìn)而影響到患者的血糖代謝情況。臨床調(diào)查發(fā)現(xiàn)， RA患者合并代謝綜合征的幾率為43%左右， 遠(yuǎn)高于正常人群的11%[8]， 表明合并代謝綜合征可能與RA患者易發(fā)心血管疾病有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)兩組的FBG、HbA1c比較未見(jiàn)顯著差異， RA對(duì)糖尿病患者的血糖代謝影響不顯著， 推斷可能與個(gè)體差異有關(guān)， 需進(jìn)一步深入研究。
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目前，我國(guó)各院校檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)采取的教學(xué)管理模式主要有三種：一是獨(dú)立的學(xué)院式管理方法，即檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的所有課程均由系負(fù)責(zé)實(shí)施和完成；二是“系科合一”管理方式，即檢驗(yàn)教學(xué)與附屬醫(yī)院為一個(gè)機(jī)構(gòu)，統(tǒng)籌安排教學(xué)與臨床實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作；三是前四年的教學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)系共同完成基礎(chǔ)課學(xué)習(xí)，第五年分別進(jìn)入不同的實(shí)踐環(huán)節(jié)。雖然管理模式不盡相同，但在培訓(xùn)目標(biāo)和課程設(shè)置等方面則大致相同。要求學(xué)生學(xué)習(xí)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等方面的基本理論知識(shí)，并進(jìn)行檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)操作技能的系統(tǒng)訓(xùn)練。其主干課程包括基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)技術(shù)；主要課程有生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)、檢驗(yàn)儀器學(xué)、分析化學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、臨床生物化學(xué)及檢驗(yàn)、免疫學(xué)及檢驗(yàn)、微生物學(xué)及檢驗(yàn)、血液學(xué)及檢驗(yàn)、寄生蟲(chóng)學(xué)及檢驗(yàn)、診斷學(xué)、內(nèi)科學(xué)、計(jì)算機(jī)基礎(chǔ)與應(yīng)用等，使用的教材基本是衛(wèi)生部規(guī)劃教材。實(shí)踐教學(xué)一般為48～56周，用于完成課間實(shí)習(xí)、檢驗(yàn)技能訓(xùn)練實(shí)習(xí)以及畢業(yè)論文。
高校檢驗(yàn)教學(xué)改革及措施
(1)改進(jìn)教學(xué)觀念、提高教學(xué)質(zhì)量：教學(xué)不僅要把科學(xué)知識(shí)傳達(dá)給教學(xué)對(duì)象，同時(shí)教學(xué)也應(yīng)是一門(mén)藝術(shù)，它不僅是語(yǔ)言的藝術(shù)，組織課堂的藝術(shù)，更是把教學(xué)目的、重點(diǎn)突出顯現(xiàn)，不斷培養(yǎng)學(xué)生聯(lián)想與思考能力的藝術(shù)。隨著科技的發(fā)展，電化教學(xué)、多媒體教學(xué)陸續(xù)走進(jìn)我們的課堂。如何更好地利用高科技手段把我們豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)及科學(xué)知識(shí)展現(xiàn)出來(lái)，就要求我們更新原有的教學(xué)觀念，不斷地利用好高科技手段，更加生動(dòng)形象作好我們的教學(xué)工作。教育者首先要受到教育，并且是自我，自覺(jué)不斷地完善與追求的過(guò)程。提高教學(xué)人員的教育觀念是頭等大事，因?yàn)榻虒W(xué)人員的教育觀念直接影響其教育行為，并且這種觀念與行為同樣也表現(xiàn)在平時(shí)的工作當(dāng)中。科學(xué)在發(fā)展，時(shí)代在前進(jìn)，為了適應(yīng)這種發(fā)展與前進(jìn)，我們必須不斷地完善充實(shí)自己，與時(shí)俱進(jìn)，樹(shù)立起科學(xué)的世界觀，將新思想、新觀念、新技術(shù)貫徹到我們的教學(xué)當(dāng)中去。在醫(yī)學(xué)科學(xué)的領(lǐng)域里，存在著許多的奧秘。有許多的已知，同時(shí)也有許多的未知。既像人們與生俱來(lái)就生長(zhǎng)著五臟六腑一樣的持久恒定，又像人們的新陳代謝生老病死，在悄悄地變化著，但是又像突然到來(lái)的SARS病毒?？茖W(xué)不能不為所有的問(wèn)題提供全部的答案，這就需要我們不斷地探索求證樹(shù)立起科學(xué)的世界觀，并盡可能地將其運(yùn)用到教學(xué)當(dāng)中去[3]。
(2)構(gòu)建新的教育體制，培養(yǎng)多層次創(chuàng)新人才：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才培養(yǎng)目標(biāo)形成的新教學(xué)內(nèi)容體系必須包括：注重打牢基礎(chǔ)，較好地反映現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、自然科學(xué)技術(shù)和人文社會(huì)科學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)；強(qiáng)調(diào)基礎(chǔ)與臨床、理論與實(shí)踐的緊密聯(lián)系，增強(qiáng)學(xué)生綜合分析、判斷和解決問(wèn)題的能力；強(qiáng)化素質(zhì)教育思想，尤其加強(qiáng)人文素質(zhì)教育，啟迪學(xué)生思維，培養(yǎng)創(chuàng)新意識(shí)和創(chuàng)新能力；加強(qiáng)英語(yǔ)口語(yǔ)訓(xùn)練與提高[4]。經(jīng)過(guò)這臨床實(shí)踐的學(xué)習(xí)，使學(xué)生具有了扎實(shí)、豐厚的知識(shí)，無(wú)疑為將來(lái)的工作、科研奠定了基礎(chǔ)。高校檢驗(yàn)教育是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)高科技發(fā)展與應(yīng)用的必然性產(chǎn)物。對(duì)全方位醫(yī)療人才的培養(yǎng)起著至關(guān)重要的作用。
(3)加強(qiáng)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生基本技能的培養(yǎng)：現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，使醫(yī)學(xué)與其他學(xué)科的滲透日益加強(qiáng)，醫(yī)學(xué)模式也逐漸發(fā)生了巨大的轉(zhuǎn)變。以提高學(xué)生的基本素質(zhì)為目的，醫(yī)學(xué)教育必須要順應(yīng)這樣的發(fā)展形式，不斷培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生“終生學(xué)習(xí)”的能力。樹(shù)立終身學(xué)習(xí)的觀點(diǎn)，大學(xué)階段不是學(xué)習(xí)的終點(diǎn)，只是職業(yè)學(xué)習(xí)生涯的起點(diǎn)。要珍惜大學(xué)學(xué)習(xí)機(jī)會(huì)，同時(shí)根據(jù)生活、工作的需要，不斷地學(xué)習(xí)。在知識(shí)經(jīng)濟(jì)社會(huì)，活到老學(xué)到老，是人們實(shí)實(shí)在在的需要，應(yīng)成為人們的一種基本生活習(xí)慣。在知識(shí)經(jīng)濟(jì)浪潮迎面襲來(lái)的時(shí)候，更新學(xué)習(xí)觀念有其重要的意義。要根據(jù)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的特點(diǎn)，在基本技能教學(xué)中，通過(guò)改進(jìn)教學(xué)方法，優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，改革考試模式，注意學(xué)生反饋信息等幾個(gè)方面對(duì)教育模式進(jìn)行改革，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生的自主性、思考性的培養(yǎng)。在注重學(xué)生基本技能培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，選擇新穎、適用的教學(xué)內(nèi)容，目的提高檢驗(yàn)教學(xué)的先進(jìn)性及實(shí)用性的前提。目前的檢驗(yàn)課主要由教師逐項(xiàng)講解教學(xué)內(nèi)容，而學(xué)生死記硬背，這樣造成學(xué)生不動(dòng)腦，不理解，聽(tīng)完課仍印象不深。
學(xué)生對(duì)教學(xué)的基本原理的理解和學(xué)習(xí)缺乏主動(dòng)性、積極性，不利于他們的獨(dú)立思考，教學(xué)效果自然不好。為了開(kāi)闊學(xué)生視野，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造能力及獨(dú)立工作能力，我們開(kāi)辟了第二課堂，利用課余時(shí)間，將部分實(shí)驗(yàn)室對(duì)學(xué)生開(kāi)放，讓學(xué)生根據(jù)自己的興趣，選擇一些有意義的教學(xué)內(nèi)容在輔導(dǎo)老師的指導(dǎo)下進(jìn)行獨(dú)立操作，這樣既培養(yǎng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，又提高了學(xué)生的獨(dú)立工作能力和創(chuàng)造性?？商岣邔W(xué)生的科研能力，使學(xué)生的思維不拘泥于實(shí)驗(yàn)中早已定好的過(guò)程。注重學(xué)生的反饋意見(jiàn)，提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果，以更好地培養(yǎng)學(xué)生的“主動(dòng)思維”。為了收集學(xué)生的反饋意見(jiàn)，可采取定期與學(xué)生座談、問(wèn)卷調(diào)查等方法。對(duì)收集到的意見(jiàn)與信息要進(jìn)行認(rèn)真分析、篩選，然后大家一起討論，尋找最佳教學(xué)方案，以提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果[5]。
培養(yǎng)高素質(zhì)檢驗(yàn)人才是時(shí)展的要求，同時(shí)要樹(shù)立起科學(xué)的世界觀、正確的工作觀、先進(jìn)的教育觀、在我們的教學(xué)當(dāng)中再也不能只重知識(shí)的灌輸、臨床意義及結(jié)果的傳授，忽視方法及過(guò)程的探究。提高教學(xué)人員的教育觀念是重中之重，因?yàn)榻虒W(xué)人員的教育觀念直接影響其教育行為和結(jié)果，并且這種觀念與行為同樣也表現(xiàn)在平時(shí)的工作當(dāng)中。為了適應(yīng)當(dāng)前社會(huì)的發(fā)展和目前高校檢驗(yàn)教學(xué)的現(xiàn)狀，我們必須不斷地完善充實(shí)自己，改進(jìn)教學(xué)觀念、構(gòu)建新的檢驗(yàn)教學(xué)體制，充分提高教學(xué)質(zhì)量，為祖國(guó)的醫(yī)學(xué)事業(yè)，培養(yǎng)出高素質(zhì)的人才。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞：獨(dú)立學(xué)院；生物技術(shù)；課程體系
中圖分類號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C DOI：10.3969/j.issn.1672-8181.2016.11.150
現(xiàn)代生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展從1953年弗朗西斯•克里克和詹姆斯•沃森發(fā)現(xiàn)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)開(kāi)始，分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)技經(jīng)過(guò)60年的發(fā)展把整個(gè)生物學(xué)帶入了嶄新的應(yīng)用領(lǐng)域。生物技術(shù)的最大特點(diǎn)是涉及的技術(shù)種類多樣且復(fù)雜，是一門(mén)跨領(lǐng)域特性極強(qiáng)的綜合性學(xué)科，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、軍事、工業(yè)、環(huán)境、能源等領(lǐng)域，其研究的深度和廣度可以小至分子、細(xì)胞乃至納米層次，也可大到組織、個(gè)體、群落甚至整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)。如果沒(méi)有生物技術(shù)的一個(gè)公認(rèn)的定義，就很難區(qū)分什么不是生物技術(shù)，生物技術(shù)學(xué)科相對(duì)獨(dú)立的學(xué)術(shù)體系，相對(duì)完整的理論框架將非常難于設(shè)置，人才培養(yǎng)課程體系的確立也無(wú)據(jù)可依。我國(guó)自1997年高校批準(zhǔn)設(shè)立生物技術(shù)專業(yè)至今，普遍采用以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)與酶工程、發(fā)酵工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)對(duì)生物技術(shù)定義進(jìn)行界定，在人才培養(yǎng)上主要以理為主，以工為輔。生物技術(shù)的定義決定了生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)的課程體系，課程體系依賴生物技術(shù)定義，并隨著定義的發(fā)展而調(diào)整。
1關(guān)于生物技術(shù)人才培養(yǎng)目標(biāo)的確立
新的工程技術(shù)的出現(xiàn)，經(jīng)常是在學(xué)科的邊緣或交叉點(diǎn)上。由于一個(gè)專業(yè)要求多種學(xué)科的綜合，而一個(gè)學(xué)科是在不同領(lǐng)域的應(yīng)用[1]，在我國(guó)高校現(xiàn)行體制中，生物技術(shù)專業(yè)往往被等同于一個(gè)二級(jí)學(xué)科，以學(xué)科的定義成為高校教學(xué)、科研的功能單位，對(duì)教師教學(xué)、科研及為社會(huì)服務(wù)進(jìn)行了界定。在這種模式下，生物技術(shù)面對(duì)大量的學(xué)科交叉應(yīng)用，在教學(xué)上卻固步自封，本科專業(yè)方向設(shè)置狹隘，閉門(mén)造車，教育教學(xué)和產(chǎn)業(yè)應(yīng)用脫節(jié)嚴(yán)重，在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、軍事、工業(yè)、環(huán)境、能源等領(lǐng)域甘當(dāng)配角，失去了生物技術(shù)專業(yè)在學(xué)科交叉領(lǐng)域的大好發(fā)展機(jī)遇。生物技術(shù)專業(yè)課程體系中的專業(yè)方向課程體現(xiàn)的應(yīng)該是專業(yè)在多種學(xué)科的綜合后在某個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用，是具體的人才培養(yǎng)應(yīng)用方向。在生物技術(shù)強(qiáng)國(guó)美國(guó)[2]，斯坦福大學(xué)的生物學(xué)專業(yè)包括生物物理、海洋生物、分子與細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、生態(tài)與進(jìn)化生物學(xué)方向；哈佛大學(xué)直接將生命科學(xué)劃成了生物學(xué)和生物化學(xué)兩個(gè)專業(yè)，生物學(xué)從遺傳學(xué)和分子生物學(xué)跨越到生態(tài)學(xué)和古生物學(xué)，而生物化學(xué)專業(yè)則主要關(guān)注的是分子和細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能；加利福尼亞大學(xué)伯克利分校含有綜合生物學(xué)與分子和細(xì)胞生物學(xué)兩個(gè)專業(yè)，后者包括生物化學(xué)和分子生物學(xué)方向、細(xì)胞和發(fā)育生物學(xué)方向、遺傳學(xué)和發(fā)育方向、免疫學(xué)方向以及神經(jīng)生物學(xué)方向。美國(guó)一流高校在生物技術(shù)人才培養(yǎng)上的顯著特點(diǎn)是：將生物學(xué)的二級(jí)學(xué)科作為本科人才培養(yǎng)的方向（又稱為課程方案）。在我國(guó)只有“985”，“211”大學(xué)才具備將生命科學(xué)的專業(yè)分支建設(shè)為生物技術(shù)的專業(yè)培養(yǎng)方向的能力，其原因主要是生物技術(shù)為實(shí)驗(yàn)性科學(xué)、需要大量的高端生物技術(shù)相關(guān)設(shè)備以及相應(yīng)的研究型學(xué)者師資。國(guó)內(nèi)獨(dú)立學(xué)院受師資、設(shè)備和資金的局限性，2013年辦學(xué)較好的前十個(gè)獨(dú)立院校中只有華中科技大學(xué)武昌分校、燕山大學(xué)里仁學(xué)院、北京師范大學(xué)珠海分校舉辦生物類專業(yè)，而且在傳統(tǒng)意義上，獨(dú)立學(xué)院生物技術(shù)學(xué)科布局非常不完善，不可能看齊國(guó)內(nèi)外一流大學(xué)，將生物學(xué)的二級(jí)學(xué)科建設(shè)為多個(gè)人才專業(yè)方向。因此，將生物技術(shù)人才培養(yǎng)與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用相結(jié)合，跨學(xué)科建設(shè)專業(yè)方向，延展學(xué)科資源共享效益，建立特色課程體系并付諸實(shí)踐是獨(dú)立學(xué)院舉辦特色生物技術(shù)相關(guān)專業(yè)的關(guān)鍵步驟。珠海市食品、醫(yī)藥和醫(yī)療機(jī)械制造產(chǎn)業(yè)發(fā)達(dá)，社會(huì)對(duì)跨學(xué)科的生物技術(shù)專業(yè)體現(xiàn)出的能力要求表現(xiàn)為食品安全領(lǐng)域的生物技術(shù)應(yīng)用需求、制藥領(lǐng)域的生物技術(shù)應(yīng)用需求以及醫(yī)療器械領(lǐng)域?qū)ι锛夹g(shù)的應(yīng)用需求。北京師范大學(xué)珠海分校在學(xué)科布局上對(duì)生物技術(shù)在專業(yè)方向設(shè)置上提供了很好的跨專業(yè)資源共享平臺(tái)。我們結(jié)合泛珠三角經(jīng)濟(jì)發(fā)展需求、依據(jù)自身實(shí)際條件首先確立如下專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)：培養(yǎng)擁有扎實(shí)的現(xiàn)代生物技術(shù)基礎(chǔ)理論，系統(tǒng)掌握生物技術(shù)的應(yīng)用實(shí)踐技能，富有利用生物技術(shù)研發(fā)生物制品的科學(xué)思維與實(shí)踐能力，可從事生物制造與生物制品安全以及食品檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域中生物技術(shù)應(yīng)用的相關(guān)研發(fā)與管理工作的高素質(zhì)專門(mén)化應(yīng)用型人才。同時(shí)，在未來(lái)5-10年內(nèi)逐步規(guī)劃制藥領(lǐng)域、醫(yī)療器械領(lǐng)域的應(yīng)用型人才培養(yǎng)方向，服務(wù)珠海市生物技術(shù)跨學(xué)科應(yīng)用型人才需求。
2關(guān)于課程模塊的優(yōu)化實(shí)踐
生物技術(shù)課程模塊式優(yōu)化有利于適用于社會(huì)對(duì)人才培養(yǎng)的需求，也有利于課程設(shè)置的穩(wěn)定性，容易總結(jié)經(jīng)驗(yàn)提高教學(xué)質(zhì)量。經(jīng)過(guò)7年的改革實(shí)踐，我校生物技術(shù)課程模塊優(yōu)化主要分為三個(gè)部分：一是精準(zhǔn)勾勒專業(yè)知識(shí)模塊。模塊優(yōu)化主要使學(xué)生清楚哪些是生物技術(shù)專業(yè)的核心課程，哪些是自己必須了解的生物基礎(chǔ)知識(shí)。生物技術(shù)專業(yè)課程體系包括微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)、生態(tài)學(xué)、植物生理學(xué)、動(dòng)物生理學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)育種學(xué)、基因工程、細(xì)胞工程、微生物工程、生化工程、生物工程下游技術(shù)、發(fā)酵工程設(shè)備、酶工程等專業(yè)內(nèi)容。受限于160學(xué)分的總限制，生物技術(shù)專業(yè)不可能將所有的內(nèi)容都開(kāi)設(shè)成單獨(dú)的課程，而且各類課程中重復(fù)性內(nèi)容較多，不利于學(xué)生綜合掌握專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)，因此在專業(yè)課程內(nèi)容設(shè)置上，必須做到“有基礎(chǔ)，有專業(yè)”。有基礎(chǔ)，用12個(gè)學(xué)分構(gòu)建生物技術(shù)的專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)結(jié)構(gòu)，共5門(mén)理論課程，知識(shí)點(diǎn)覆蓋微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)、生態(tài)學(xué)、植物生理學(xué)、動(dòng)物生理學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)、微生物學(xué)、人體結(jié)構(gòu)與生理等上游生物技術(shù)基礎(chǔ)知識(shí)；有專業(yè)，用20個(gè)學(xué)分構(gòu)建五個(gè)核心專業(yè)課程，含基因工程與分子生物學(xué)，細(xì)胞工程，發(fā)酵工程，蛋白質(zhì)工程原理及應(yīng)用，酶學(xué)原理與酶工程。二是構(gòu)筑適應(yīng)社會(huì)需求的專業(yè)應(yīng)用模塊。專業(yè)方向課程的設(shè)置要具備一定的靈活性，以應(yīng)用性、實(shí)用性為準(zhǔn)則，必修和選修互補(bǔ)，模塊上除設(shè)置食品安全檢驗(yàn)檢疫生物技術(shù)必修模塊外，充分考慮學(xué)生就業(yè)、升學(xué)、留學(xué)需求，盡可能提供適應(yīng)學(xué)生需求的選修課程模塊，滿足個(gè)性發(fā)展需求。專業(yè)方向必修模塊包括：現(xiàn)代儀器分析、HACCP原理與應(yīng)用、分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)、食品安全控制技術(shù)、食品衛(wèi)生毒理學(xué)、現(xiàn)代食品分析技術(shù)。專業(yè)方向選修模塊包括：生物化學(xué)和分子生物學(xué)、細(xì)胞和發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、免疫學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、藥物設(shè)計(jì)與藥物研究、生物物理學(xué)、生物儀器分析、工程制圖、電工電子學(xué)等?？傊?，專業(yè)方向課程模塊優(yōu)化的方向是甩開(kāi)傳統(tǒng)學(xué)科分類包袱，以實(shí)際應(yīng)用為導(dǎo)向，以現(xiàn)實(shí)資源為依托，開(kāi)展交叉學(xué)科人才培養(yǎng)適應(yīng)社會(huì)需求。三是夯實(shí)提高學(xué)生實(shí)踐能力的實(shí)踐模塊。人才培養(yǎng)要做到實(shí)效性，必須用實(shí)驗(yàn)課程來(lái)培養(yǎng)學(xué)生。我們逐步取消了一課一實(shí)驗(yàn)配套的辦法，將所有實(shí)驗(yàn)課整合成獨(dú)立規(guī)劃的實(shí)踐課程，綜合后分為4個(gè)階段：第一階段主要在各專業(yè)實(shí)驗(yàn)課里完成，實(shí)行課堂化管理（分為四個(gè)技能訓(xùn)練課程，每周4-6學(xué)時(shí)），最后考察評(píng)價(jià)，夯實(shí)基本生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?；第二階段在專題研究課程內(nèi)完成，教師單獨(dú)輔導(dǎo)，以開(kāi)題報(bào)告，研究報(bào)告作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，獲得相應(yīng)學(xué)分；第三階段主要在國(guó)內(nèi)外實(shí)踐基地統(tǒng)一組織、自由安排時(shí)間進(jìn)行專業(yè)技能培訓(xùn)，以大量的實(shí)踐、見(jiàn)習(xí)、參觀為主要手段，融入部分畢業(yè)實(shí)習(xí)內(nèi)容，獨(dú)立撰寫(xiě)實(shí)習(xí)報(bào)告；第四階段主要在校內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室完成，根據(jù)畢業(yè)論文具體要求，在相應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果前提下，獨(dú)立撰寫(xiě)畢業(yè)論文，并參加答辯。
3關(guān)于保障生物技術(shù)課程體系實(shí)施的實(shí)驗(yàn)條件
生物技術(shù)在學(xué)科劃分上理工不分，即可以發(fā)理學(xué)學(xué)位，也可以發(fā)工學(xué)學(xué)位，實(shí)驗(yàn)科學(xué)的特性決定了生物技術(shù)人才培養(yǎng)的高成本，高投入。獨(dú)立學(xué)院自籌經(jīng)費(fèi)的特點(diǎn)決定了學(xué)校在舉辦生物類專業(yè)上與公辦高校在人才、資金投入上相去甚遠(yuǎn)的現(xiàn)狀。我校作為高等教育改革試驗(yàn)區(qū)，舉辦生物技術(shù)專業(yè)同樣面臨資金、人才匱乏局面。只有通過(guò)社會(huì)資源的整合，協(xié)同創(chuàng)新辦學(xué)體制才能解決生物技術(shù)專業(yè)對(duì)高端設(shè)備的需求，同時(shí)實(shí)踐基地的建設(shè)要從人才培養(yǎng)的角度出發(fā)，設(shè)備應(yīng)符合現(xiàn)代生物技術(shù)人才培養(yǎng)以及特色專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)的需求。經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)搜索和對(duì)珠海300家企業(yè)的調(diào)研發(fā)現(xiàn)：與用人單位共同培養(yǎng)食品安全領(lǐng)域的生物技術(shù)應(yīng)用人才符合國(guó)家和珠海地區(qū)發(fā)展的需要。2007年我校與國(guó)家進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫局珠海局正式簽署協(xié)議協(xié)同培養(yǎng)生物技術(shù)專業(yè)人才。通過(guò)辦學(xué)模式的創(chuàng)新，“平等自愿、產(chǎn)權(quán)不變、協(xié)同建設(shè)、資源共享”的方針使得雙方能夠大膽持續(xù)投入，共建共享實(shí)驗(yàn)室，至今我校已經(jīng)建立了分子生物學(xué)、衛(wèi)生檢驗(yàn)檢疫兩個(gè)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)室，部分生物實(shí)驗(yàn)室達(dá)到生物安全二級(jí)水平，實(shí)驗(yàn)條件滿足生物技術(shù)課程體系的教學(xué)實(shí)踐要求。另外，在實(shí)踐課程經(jīng)費(fèi)投入方面，生均實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)為750元/人，學(xué)院預(yù)算儀器購(gòu)置費(fèi)為2857元/生，年度生均實(shí)踐環(huán)節(jié)總投入為3607元/生，將教育部2004年2號(hào)文件“學(xué)費(fèi)20%直接用于教學(xué)”的規(guī)定不打折扣落到實(shí)處。
4生物技術(shù)課程體系改革實(shí)踐效果
學(xué)生服務(wù)社會(huì)的能力是課程體系改革成功與否的試金石。首先，實(shí)驗(yàn)條件是實(shí)現(xiàn)生物技術(shù)專業(yè)課程體系規(guī)劃的重要保障，“檢學(xué)”協(xié)同創(chuàng)建高水平的、可持續(xù)發(fā)展的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室體系為執(zhí)行生物技術(shù)課程體系，進(jìn)行人才培養(yǎng)、創(chuàng)造了先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)，學(xué)生實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練得到有力的保障；其次，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室共建、資源共享，協(xié)同管理，把直接為企業(yè)提供食品安全檢測(cè)的國(guó)家級(jí)區(qū)域性中心實(shí)驗(yàn)室對(duì)學(xué)生開(kāi)放，作為學(xué)生通過(guò)高層次技術(shù)服務(wù)學(xué)習(xí)的平臺(tái)，對(duì)學(xué)生具有深遠(yuǎn)的“學(xué)有所用”的意義，學(xué)生能夠用自己的專業(yè)知識(shí)直接服務(wù)于社會(huì)，并作為切身利益方對(duì)課程體系設(shè)置的反饋能夠直接基于社會(huì)的實(shí)際需求，這優(yōu)于任何第三方去評(píng)價(jià)課程體系改革效果；最后，摸索出了適應(yīng)特殊機(jī)制大學(xué)應(yīng)用型生物技術(shù)人才培養(yǎng)課程體系，取得了明顯效果，學(xué)生升學(xué)率達(dá)20%，就業(yè)率高于地區(qū)平均水平，學(xué)生得到了實(shí)實(shí)在在的收獲。
參考文獻(xiàn)：
[1]劉春惠.論“學(xué)科”與“專業(yè)”的關(guān)系[J].北京郵電大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版),2006,(2):66-71.
