時間：2022-05-27 07:46:04
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇血細胞分析儀，希望這些內容能成為您創作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進步。
血細胞分析儀具有快速、方便、重復性好、工作效率高等特點。目前各大、中醫院檢驗科已廣泛應用。但血細胞分析儀測定血小板計數，常會出現結果誤差，這是臨床經常遇到的問題。為此，本文主要對血細胞分析儀計數血小板的影響因素進行分析，旨在為臨床提供可靠的診斷依據。
1 材料與方法
1.1 儀器:采用的儀器是日本Sysmex公司生產的KX-21型全自動血細胞分析儀。
1.2 試劑 ① 儀器用的稀釋液、清洗液、溶血劑均由日本Sysmex公司提供。② 顯微鏡計數用的血小板稀釋液按《全國臨床檢驗操作規程》（第二版）配制，冰箱保存。 ③EDTA-K2抗凝劑
1.3 標本來源 選自2008年1月-2008年12月本院門診及住院的血小板結果異常的血標本共207例，另挑選血小板結果正常的血100作對照。
1.4 用EDTA-K2抗凝全血2ml，充分混勻后，2小時內KX-21型全自動血細胞分析儀檢測，取血小板檢測結果異常的血標本，同時用顯微鏡手工計數，另取血小板檢測結果正常的血標本100例同時用顯微鏡手工計數，比較兩法結果。
2 結果
血小板少于100×109／L的血標本121例，為A組；血小板大于300×109／L的血標本86例，為B組；lind板在100~300×109／L的血標本100例，為C組，其兩法測定結果如表1所示。
3 討論
3.1 在Sysmex X-21型全自動血細胞分析儀檢測中，由于紅細胞和血小板的計數是在同一通道中進行，且它們之間僅以體積大小來區別，因此，血小板的計數易受小紅細胞數量或紅細胞碎片的影響，由于血液中小紅細胞的數量遠大于血小板數量，即使有少量的小紅細胞混入血小板計數范圍內，也會對血小板計數造成很大的影響。在血小板直方圖右側下降后繼而抬高呈駝峰樣改變，血片油鏡檢查顯示紅細胞較小或紅細胞碎片較多，兩種方法血小板計數結果比較，差異有統計學意義（P＜0.01）.
3.2 由于血小板的特點易于粘附、聚集。李永紅等認為采血是否順利是造成血小板偏低的的一個重要原因。采血過程中因操作緩慢，穿刺不順且組織受損后，組織凝血因子易混入血標本，混勻不及時等均可促成血小板聚集，從而產生肉眼看不見的小凝塊，這是血細胞分析儀測定血小板結果偏低的常見原因之一。這時血片鏡檢可見血小板聚集成堆。遇到這種情況應重新采血測定。
3.3 某些血液病可造成血小板數真正減少，如骨髓巨核細胞生成不良（如障）；血小板破壞增加（如DIC、IPT）;血小板分布異常（如脾大）等。
3.4 標本放置時間過長、試劑質量、地線、電源和藥物等因素均能對血小板的計數造成一定程度的影響，因此檢測過程中應盡可能排除各種因素的干擾，以使血小板計數可靠，為臨床診斷治療提供有參考意義的數據。
參考文獻
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血小板假性減低的因素
采血不順利：此種情況多發生在老人，兒童及體質較差的的患者身上，因采血不順引起組織損傷，凝血因子混入血標本造成血小板集聚［1］，產生微小的目測不到的凝塊。這是引起血小板假性減低最常見的原因。這些標本涂片鏡檢時可見大量的血小板凝聚成團。
標本放置時間：用EDTAK2作為抗凝劑已被國際血液學標本委員會認定并廣泛應用。EDTAK2會使血小板形態發生變化，其外膜形成微小管。游離端向外伸展形成偽足，這些偽足纏繞在一起形成血小板可逆聚集體若在。此時測定血小板會假性減低，直方圖呈鋸齒狀異常。但隨著時間延長可逆性聚集體會破壞［2］。因此采取室溫放置30分鐘可以避免這種情況的血小板假性減少［3］。
血小板EDTA依賴性聚集：一些患者血標本與EDTA抗凝劑混合后其血小板會發生EDTA依賴性聚集，有報道認為血小板EDTA依賴性聚集與血小板表面抗原（IGA、TGG、IGM）的自身抗體以及患者血清中抗心磷脂抗體有關由于全細胞分析儀對凝集體的結構不能識別，一些血小板未被計數導致血小板假性減低［4］，這種凝集可見血小板直方圖異常，涂片鏡檢可見大量血小板凝集成團。
巨大血小板導致血小板計數假性降低：病人由于某些疾病血小板體積較大，超出了血細胞分析儀測定血小板的閾值，使血小板計數假性降低。在此種情況可見血小板直方圖底部分布較寬，MPV值較高。血涂片瑞氏染色后可見血小板體積較大。
血小板衛星現象：血小板衛星現象是指EDTA抗凝血中血小板黏附于白細胞周圍，這是由于白細胞表面的IGG或FC片斷與血小板表面的GPⅡB/ⅢA結合所致。由于一些血小板黏附于白細胞上，細胞分析儀計數血小板時未被計入導致血小板假性減少［5］。通過血涂片鏡檢可見大量血小板圍繞在多形核白細胞的周圍，形狀很象衛星。這種情況較少見，有報道稱加入枸櫞酸鹽可消除此現象。
血小板假性增高
溶血：標本溶血后紅細胞和白細胞受到破壞，破碎的紅白細胞碎片體積和血小板相近，都可被細胞分析儀誤計為血小板，使血小板計數假性增高。
小紅細胞：如果紅細胞體積過小，接近血小板體積的測定范圍，由于儀器只識別顆粒大小，不識別顆粒性質，誤將小紅細胞計成血小板，導致血小板假性升高，此種情況可見血小板直方圖尾部異常，涂片鏡檢可見紅細胞體積較小。
總之，造成血小板誤差的原因很多。這要求在實際工作中不僅要嚴格按照操作規程操作，還要仔細審核結果，如果發現血小板數目過高或過低、直方圖分布異常、計數與臨床不符時都應涂片鏡檢并重新計數。
參考文獻
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3 李勝發,程大林.血小板可逆性聚集在全血細胞分析儀中的影響［J］.臨床檢驗雜志,2003,21（1）:37.
【關鍵詞】血細胞分析儀；性能；評價
前言
血細胞分析儀具有快速、方便、工作效率高等優點，已經廣泛應用于各大、中醫院檢驗科。隨著科學技術的發展，血細胞分析儀日益完善，為臨床提供了血細胞直方圖等普通手段難以測量的參數，使血細胞形態學觀察不再只局限于顯微鏡下少數細胞的微觀結構。由美國貝克曼-庫爾特公司生產的五分類HMX型血細胞分析儀采用VCS（電導、射頻、激光）技術，對接近原態細胞的體積、核質比、顆粒特性進行精確的測定和分析，其結果于三維空間內將細胞區分為五個亞型，達到白細胞五分類的目的。當標本中存在異常細胞時，根據儀器內定和人工設定的參數閾值，對可疑異常細胞作出報警提示。此外，Coulter HMX型血細胞分析儀增加了網織紅細胞有關參數的測定，為臨床診斷及患者預后觀察提供了更多參考價值。為了探討該分析儀的精密度、準確度及攜帶污染率，對白細胞五分類結果及異常細胞報警提示的可信性，鏡檢與儀器檢測兩種方法同時進行網織紅細胞計數的相關性，我們通過復片觀察，比較兩者的符合率，以對該儀器性能作以評價。
1材料
1.1儀器：Beckman Coulter HMX血細胞分析儀（美國貝克曼-庫爾特公司），雙目顯微鏡（Olympus公司）
1.2試劑：由美國庫爾特公司生產的與HMX型血細胞分析儀配套使用的試劑。溶血劑 批號：101607F ；稀釋液 批號：C303005；清洗劑 批號：C211001B；網織紅細胞試劑 批號：109162;高、中、低三種定值全血質控物 批號：885000 ；1%煌焦油藍試劑 按《全國臨床檢驗操作規程》第二版配制
1.3標本來源：門診及本院住院患者
2統計學處理
采用SPSS For Window 11.0統計軟件進行方差分析
3方法與結果
3.1精密度與準確度的測定：以高、中、低三種已知定值的全血質控物連續測定10次，計算出其中四項的均值（X）、標準差（S）、變異系數（CV）。評價精密度選用CV值，其結果見表1，質控物實驗組測定值與靶值比較評價儀器的準確度，選用方差分析,各項P>0.0 5，說明實驗組的測定值與靶值無明顯差別，即儀器的準確度較好。
表1 三種已知定值質控物測定值
3.2攜帶污染率檢測:先連續測定高值樣品3次(H1、H2、H3),緊接著再連續測定低值樣品3次(L1、L2、L3),通過公式攜帶污染率=L1-L3/H3-L3*100%計算結果,WBC、RBC、HB、PLT各項攜帶污染率在0～1.13%之間。
3.3網織紅細胞計數儀器法與鏡檢法比較：選取30例樣品，將全血與網織紅細胞試劑混勻溫育5分鐘，每份樣品用儀器測定的同時采用手工法完成計數。每份標本均測2次，取平均值，由本科2名富有經驗的中級職稱以上人員進行。為判斷方法間有無顯著性差異，即主要是評價儀器的性能，因此不考慮會產生影響的人與人之間的顯著性差異，進行方法學之間的單因素方差分析。由分析得出P>0.05,說明兩方法之間不存在顯著性差異，這表明機器法與手工法進行網織紅細胞計數結果差別不明顯，說明機器性能良好，可信度較高。
3.4白細胞分類儀器法與手工法相關性分析：隨機選取30份樣品進行儀器測定的同時，將各樣品制備血涂片，瑞氏染色鏡檢200個白細胞分類（鑒于嗜堿性粒細胞少見，這里不作以分析比較）。由本科2位富有經驗中級職稱以上的老檢驗人員完成。通過兩者的測定值比較二者的相關性。為斷定方法之間有無顯著性差異，即是主要要評價機器的性能，故不考慮會產生影響的人與人之間的顯著性差異，只做方法之間的單因素方差分析。經統計分析得到各項中P>0.05,說明兩方法不存在顯著性差異，即儀器法與手工法顯著性差異不明顯，說明儀器法同手工法的符合率很好。
3.5儀器對形態異常細胞提示功能的評價：另選取門診及本院住院患者標本30例，上機檢測的同時各涂血片，瑞氏染色，鏡下計數200個白細胞。儀器的操作嚴格按照操作手冊完成。(1)Imm NE;(2)NRBC/Platelet Clumps;(3)Blast/Variant LY三項中儀器顯示的任何一項提示為陽性。顯微鏡分類符合下列標準之一即判定為陽性：(1)中性桿狀核粒細胞＞15%；(2)不典型淋巴細胞＞10%；(3)晚幼粒或更早階段粒細胞＞1%；(4)幼紅細胞占白細胞數1%以上[1]。以鏡檢結果為標準，儀器及鏡檢均為陽性，定義為真陽性（14例）；儀器陽性而鏡檢陰性的定義為假陽性（4例）；二者均為陰性的定義為真陰性（12例）；儀器陰性而鏡檢陽性的定義為假陰性（0例）。據此得出本組病例中儀器對形態異常血細胞得提示功能特異性為75.0%；敏感性為100%；檢出有效率為86.7%；假陽性占13.3%；假陰性占0%。
3種異常結果提示及儀器與鏡檢陽性符合率分析。見表2
表2 儀器提示3種異常結果與顯微鏡目測比較
4討論
由美國貝克曼-庫爾特公司生產的Beckman Coulter HMX型血細胞分析儀采用了VCS三維技術對全血細胞進行分析。其優點是不但可以對白細胞進行五分類，而且可以進行網織紅細胞計數，適合大批量標本的篩查檢測。不但為臨床提供了更多的診斷及治療信息，而且為檢驗科在繁重的工作中節省時間、人力，提高了效率。該設備在開機時可自動測知本底，以便了解儀器中各試劑的使用情況。使用中操作簡單，可連續測定，速度快。儀器連有顯示屏，各系統操作均在屏幕上完成，實現了人機對話，以利于掌握測量分析中的各種信息。另外，屏幕上在顯示各項測定值的同時配有三維直方圖及報警提示，使操作人員更直觀地了解該標本的基本情況，達到對該批標本進行初篩的作用。
[關鍵詞] 血細胞分析儀；自動全血模式；預稀釋模式
[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）06-0074-03
眾所周知，隨著當前醫療衛生事業的不斷發展，醫療診療設備不斷進入醫療衛生機構。檢驗設備更是日新月異，尤其是大型全自動檢驗設備的投入，更大大提高了工作效率，節省了患者就診時間，降低了勞動強度，節省了人力資源；同時也降低了人為誤差，提高了準確度。全自動血細胞分析儀作為醫院患者的三大常規檢測項目之一的檢測設備，更是在醫院得到廣泛應用[1]。自動全血模式和預稀釋模式是全自動血細胞分析儀常用的兩種檢測模式，為了了解兩種模式在邁瑞BC-5600全自動血細胞分析儀上的檢測性能，2013年10月我們將血細胞分析儀專用質控物（光學法）用這兩種檢測模式各進行30次檢測，現報道如下。
1 儀器、材料與方法
1.1 儀器及試劑
邁瑞BC-5600全自動血細胞分析儀，中國深圳邁瑞公司產品，該儀器具有自動全血和預稀釋模式，全部使用原裝配套的稀釋液、溶血劑、清洗液、校準品和質控品。
1.2 材料
1.2.1 血細胞分析儀用質控物（光學法）水平中值 3.0mL；型號：BC-SD；P/N：040-00/426-00.LOT.BC309AN.2013-11-05；深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司MINDRAY，BC.5600。
1.2.2 自動全血模式樣本 血細胞分析儀用質控物（光學法）水平中值：從冰箱取出，恢復室溫，混勻后上機自動檢測。
1.2.3 預稀釋模式樣本 40 μL的血細胞分析儀用質控物和120 μL的稀釋液混合均勻，即配成預稀釋模式樣本。
1.3 方法
1.3.1 檢測方法 按儀器操作說明[2]，調整校對好BC-5600全自動血細胞分析儀，在這兩種檢測模式下對兩種模式樣本各進行30次檢測。
1.3.2 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件對兩種模式實驗數據[白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）的結果]進行處理，結果用均值±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，P < 0.05為差異有統計學意義。
2 結果
邁瑞BC-SD血液細胞質控物在BC-5600全自動血細胞分析儀的兩種模式各30次的檢測結果見表1。對比兩種檢測模式的結果不難看出自動全血模式下的各項目精密度優于預稀釋模式。兩種模式白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細胞比容（HCT）差異極為顯著，而血小板（PLT）的結果無差異。
3 討論
血細胞檢測作為醫院就診者的常規檢測項目，對就診人員是否存在出血、炎癥、感染、貧血和血液系統疾病等提供重要診療信息[3-7]。尤其對那些以傳染病、肝膽病患者為主的專科性醫療機構，血細胞檢測在細菌/病毒感染、脾功能亢進、消化道出血患者的診療以及抗病毒藥物治療過程中更加重要[8-10]。
血細胞分析儀自從20世紀50年代，庫爾特（Coulter WH）根據血細胞是不良導體的特性，在電解質溶液中懸浮細胞顆粒在通過計數小孔時引起電阻變化，再經儀器放大、甄別、整形、計數，生產出第一臺血細胞計數儀后，開創了血細胞計數的新篇章，實現了血細胞計數的自動化。目前，隨著科技的不斷發展，血細胞計數儀在庫爾特原理基礎上有了新的飛躍。血細胞計數儀也由半自動到全自動，三分類發展到五分類；儀器的設計更加精密、嚴謹，功能更加完善，分析方法也不斷更新換代。全自動血細胞分析儀BC-5600應用半導體激光流式細胞技術獲得白細胞總數和五類白細胞的分類統計計數；血紅蛋白濃度采用比色法；紅細胞和血小板數目以及體積分布用電阻抗法檢測；其余參數由分析儀計算得出。
由表1不難看出，自動全血模式結果的標準差和變異系數較預稀釋模式的小，其結果的精準度也就更可靠[11]。自動全血模式的重復性、精密度之所以較預稀釋模式的好，是由于自動全血模式的檢測全程基本都在封閉的環境中進行，既沒有人工操作的參與，也不受外界環境影響，更沒有交叉污染的干擾；再加現代儀器的做工精良、考究、嚴謹，使得儀器在檢測過程中的吸樣和稀釋兩步固有誤差降低，并可通過質控品和校準品進行校正和修正。而預稀釋模式下，從預稀釋液的準備及末梢血樣本的采集、吸取、混勻到放置后混勻上機檢測，整個過程都在外環境中暴露，是開放性的；此過程中，稀釋液采集的精準、人工末梢血采集時的污染、采血微量管的偏差、吸取末梢血及混勻操作的差異、還有試劑水分蒸發和空氣中顆粒污染等隨機誤差很難消除，因而對檢測結果造成偏差，影響準確性。
從本文可知外周血誤差大、重復性差，因此做血細胞分析時盡量按《全國臨床檢驗操作規程》要求采用抗凝靜脈血，而少用外周末梢血。并按國際血液學標準化委員會的要求用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝，且含量為每毫升血液用1.5～2.2 mg抗凝劑[4]。要嚴格控制血液與抗凝劑的比例，不能過高或過低，否則影響血細胞計數的準確性。對于極個別因使用EDTA-K2抗凝造成血小板偏低者，可換成枸櫞酸鹽或在EDTA-K2抗凝血中加入肝磷脂[12]。另外，使用抗凝靜脈血不僅防止了交叉污染，延長了儀器壽命，還能滿足原標本的復檢和正確反映患者外周血的實際情況。但BC-5600預稀釋模式的稀釋樣品僅可以計數1次，對超出儀器檢測能力或異常的樣本仍需要再次采集血液，增加患者的痛苦。
為了確保結果準確、可靠，在使用血液細胞分析儀時應注意如下幾點：①工作人員上機前要熟讀儀器和試劑說明書，掌握原理并嚴格按程序操作，并使用原廠配套試劑[4，13]。②用EDTA-K2真空采血管采集靜脈血，并立即顛倒混勻；抗凝血采集后在室溫中不應超過6 h；如需制作血涂片應在2 h內完成。③檢測前必須將樣本充分混勻。④標本上機前應仔細檢查標本量和有無凝塊[6]。⑤對于血細胞分析儀結果異常樣本應推片染色顯微鏡下鏡檢，當然，對于嬰幼兒等特殊患者，可采用末梢血檢測，而檢測結果需校正后方可發出報告。
總之，自動全血模式檢測具有良好的重復性、準確性，優于預稀釋模式，建議推廣，各級醫療單位可根據實際情況合理選擇。
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桐鄉第四人民醫院 浙江省桐鄉市 314051
【摘 要】目的：了解不同保存條件對血細胞分析儀檢測結果所產生的影響。方法：采用日本Sysmex 公司的SF-3000 全自動血細胞分析儀及配套試劑，將抽取的血液標本按1ml/ 支的規格分別置入27 支試管并加塞蓋緊，平均分為3 組，分別置于4℃、20℃、30℃的條件下保存。以標本在室溫（20℃）條件下放置1h 時的測定結果作為基準，將其余時間點的測定結果與基準值進行比較。結果：白細胞、紅細胞、血小板參數均會受到來自保存條件和送檢時間的影響。結論：在應用SF-3000 全自動血細胞分析儀的過程中，所使用的抗凝血標本最佳保存溫度為4℃。若于室溫條件（20℃）下保存，應于8h 內完成血標本的檢測操作。
關鍵詞 血細胞分析儀；血標本保存條件；檢測準確性
血細胞分析儀的廣泛應用為提高檢測結果的準確性、治療方法的針對性和合理性發揮了積極的推動作用。但在實際工作中，難免會出現血液標本無法及時送檢的情況，若保存不當，勢必會對檢測結果的準確性產生負面影響。為此，本次研究圍繞不同保存條件對血細胞分析儀檢測結果的影響展開分析和討論，現將研究過程報告如下。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑
采用日本Sysmex 公司的SF-3000 全自動血細胞分析儀及配套試劑，儀器在試驗前已經過校準。
1.2 方法
1.2.1 標本采集
抽取健康志愿者的靜脈血30ml，將其注入含有50mg EDTA-2K 的燒瓶（已硅化）混勻抗凝，即刻上機。按1ml/ 支的規格將血液分別置入27 支試管并加塞蓋緊，隨后平均分為3 組，分別置于4℃、20℃、30℃的條件下保存。在采血后的1、2、4、6、8、12、24、48、72h 這9 個時間點，分別從三組中取出一支試管進行血細胞分析。
1.2.2 分析方法
設備預熱30min 后即開始測定（保存條件為4℃的標本取出后需在室溫下平衡10min），每支標本進行兩次平行測定，取各參數均值打印并進行分析。每日使用質控物對儀器進行檢測，以確保血標本檢測結果的準確性不會受到來自儀器因素的影響。
1.3 評價標準
依據儀器對標本檢測的精密度，以標本在室溫（20℃）條件下放置1h 時的測定結果作為基準，將其余時間點的測定結果與基準值進行比較。以白細胞參數變化率>3%、紅細胞參數變化率>2%、血小板參數變化率>5% 為有意義。
2 結果
2.1 白細胞參數變化情況
白細胞計數（ 下簡稱WBC） 在48h（4℃）、24h（20℃）、8h（30℃）的測定值以及白細胞分類在12h（4 ℃）、8h（20℃）、4h（30℃）的測定值基本穩定，參數變化率<3%。其余各時間點3 組血標本的WBC 水平均表現出下降趨勢，在20℃、30℃的變化更點圖上，各細胞群的散點開始分散，散間分區混亂，報警增多。
淋巴細胞、單核細胞比例表現出上升趨勢，中性粒細胞比例表現出下降趨勢。
2.2 紅細胞參數變化情況
除始終處于穩定狀態的血紅蛋白（下簡稱HGB）外，其余參數均受到來自溫度因素的影響。保存條件為4℃的血標本，紅細胞值（下簡稱RBC）、紅細胞平均體積（下簡稱MCV）、紅細胞比容（下簡稱HCT）在48h 內的測定值基本穩定，變化率<2%。48h 后，MCV 與HCT 的測定值表現出輕微的上升趨勢。保存條件為20℃的血標本，RBC（48h 內）、MCV、HCT（12h內）的測定值基本穩定，變化率<2%。保存條件為30℃的血標本，RBC（24h 內）、MCV、HCT（8h 內）的測定值基本穩定，變化率2%。
MCV 在12h 后（20℃）、8h 后（30℃）的測定值呈現出迅速提升的趨勢，HCT 的測定值隨MCV 的升高而升高。在72h 時，RBC 在三種保存條件下的測定值均出現不同程度的下降，其中，30℃條件下的下降幅度最大，究其原因，可能與MCV 明顯升高、紅細胞膜發生破裂有關。
2.3 血小板參數變化情況
血小板值（ 下簡稱PLT） 在48h 內（4℃）、24h 內（20℃）、12h 內（30℃）的測定值基本穩定，血小板平均體積（下簡稱MPV）在4℃（8h 內）、20℃（6h 內）、30℃（4h 內）的測定值基本穩定，變化率<5%。其余各時間點3 組血標本的PLT 水平均表現出上升趨勢，尤以20℃、30℃條件下的表現最為突出。與此同時，MPV 也呈現出快速上升的趨勢，在24h 時間點，4℃條件下的變化率為14.1%、20℃條件下的變化率為25.7%、30℃條件下的變化率為34.6%。
3 討論
本次研究的結果顯示，在應用血細胞分析儀的過程中，所使用的抗凝血標本最佳保存溫度為4℃。若于室溫條件（20℃）下保存，應于8h 內完成血標本的檢測操作。若環境溫度≥ 30℃，應于4h 內完成血標本的檢測操作。即在日常工作中，若由于某些原因限制而不能立即完成血標本的送檢，應盡可能將標本放置在4℃的溫度環境下保存，如果條件不允許，則應將其放置在20℃的溫度環境（有空調的室溫條件）下保存，以免對血細胞分析儀檢測結果的準確性產生負面影響。
需要注意的一點是，不同廠商生產的血細胞分析儀對于WBC的檢測原理不同，因此在實際操作的過程中，應針對所采用的分析儀類型對最佳保存條件進行確認，切忌生搬硬套。
參考文獻
關鍵詞：血細胞分析儀；血小板異常；血涂片染色；顯微鏡
血小板（PLT）的功能主要是促進止血和加速凝血，血小板的數量和質量的異常會導致出血性疾病。血小板數量的減少常見于血小板減少性紫癜，再生障礙性貧血，脾功能亢進和白血病等有關病癥。血小板數量增加多見于常見于骨髓增生性疾病，如慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多癥、原發性血小板增多癥等病癥。血小板質量異常主要見于血小板無力癥，因此對血小板數量檢測是臨床最常用的檢驗項目之一，血小板的檢測是臨床診斷和治療各種原因血小板減少癥的重要指標。患者的血小板減少或增加可能會指導臨床醫師抽骨髓檢查或輸入血小板治療，因此判斷和鑒定血小板的減少或增加是極其重要和必須的。及時發現各種原因所引起的血小板假性減少和假性增加，有效地減少了因為診斷和治療錯誤而引起的醫療糾紛，因此如果能及時發現這對醫生和患者來說都尤為重要。隨著檢驗技術的發展，血細胞分析儀已基本普及，血細胞分析儀在測定血細胞方面，特別是測定血小板具有檢測方便，快捷和重復性好以及工作效率高等諸多優點，已在各大、中醫院檢驗科的臨床檢驗工作中廣泛應用。血小板檢查是臨床血常規檢查中的重要檢查項目，由于測定時受諸多因素影響，熟練掌握常見的測定影響因素能有效地指導臨床的診斷與治療。但是在實際檢測中，由于血細胞分析儀在測定血小板時常常會出現血小板的假性減少或增加，而且產生的原因復雜多變，這給操作者辨別真偽帶來一定困難，一旦辨別錯誤，容易引起醫療事故和糾紛，這應該引起臨床廣泛注意。
1資料與方法
1.1一般資料 收集壽縣縣醫院2011年7月～2013年6月儀器測定PLT500×109/L 100例，年齡8月～45歲，其中內科100例，兒科150例。
1.2儀器與試劑 SYSMEX-1800i全自動血細胞分析儀，雙筒顯微鏡，原裝配套試劑、質控物，瑞氏染色液。
1.3方法
1.3.1患者靜脈采血，2ml血加入含有EDTA-K3抗凝真空管中，充分混勻，在1h內上機完成，每份標本測定3次，取平均值。
1.3.2對250例血小板結果異常的標本，同時進行血涂片復檢，儀器計數相符合的標本（片中無血小板聚集現象，散在分布，與涂片觀察相符）200例，其中50例為假性血小板減少和增加。
1.3.3診斷血小板假性減少的標準。當血小板計數低于50×109/L時，多是顯著性減少，而且此時并沒有淺表皮膚及黏膜出血；顯微鏡檢查發現血小板聚集成堆，在排除標本采集中不慎發生的凝集現象，這時可診斷為血小板假性減少。
1.3.4血涂片法 將血液標本推片、染色后，油鏡下進行讀片。血涂片法血小板數（×109/L）=涂片計數血小板的數×血液細胞分析儀白細胞數（×109/L）/涂片計數血小板時所能見到白細胞數。
2結果
2.1排除了50例血小板假性增加和假性減少后，其余200例血細胞計數血小板增加或減少時與涂片法比較，符合率為（70/100）70%、（130/150）87%。
2.2 50例血小板假性增加和假性減少儀器法與血涂片法比較，見表1。
3討論
采血是否順利是造成血小板偏低的一個重要影響因素，采集手指末梢血時，因進針淺，出血慢，擠壓采血部位，使組織液滲入血液中，造成血小板減少，采集靜脈血，若采血過程不順利，血流不暢，靜脈經多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時，因組織損傷，導致組織凝血因子混入血標本，產生肉眼看不見的微小凝塊，造成血小板減少，這是造成血細胞計數測定血小板結果偏低的常見的原因。因此，在閱片時應特別注意血小板減少患者閱片，如果必要應重新采血復查。
血液標本放置的時間過短也能造成血小板結果偏低。在實際的工作中，在采取血液標本后都是立即開始檢測，這時常常會出現血小板計數假性減少現象。究其原因，是因為血小板離體后，血小板的形態發生了變化，血小板外膜形成的微小管的游離端向外擴展，這使得在血小板周圍形成一些絲狀偽足，這些血小板偽足相互作用，形成了血小板可逆聚集體。這種血小板因為很難被溶血劑溶解，這使得血小板計數會暫時減少，隨著時間的慢慢推移，這種假性聚集會發生一定程度的解聚。因此，為了提高準確性，建議在采血后放置15～20min再測定可得到準確結果。
自動化的血液分析儀，無論是阻抗法還是光散射法，對于血小板數及形態正常的標本，結果一般比較可靠。但是，對于血小板明顯減少或血小板形態異常者來講，用自動化的血液分析儀來分析計數誤差較大，甚至有時很難計數。主要原因是阻抗法和光散射法基本上都是按照細胞的大小來區分和計數的，但是正常人的血小板體積相差較大，而且體積分布的直方圖并不是對稱分布，而是明顯向右延伸，也就是是說存在一些大的血小板。在病理的情況下，會更多地增加一些大血小板。因為多數血液分析儀較難區分出小紅細胞與大血小板，這使得很多大血小板被認為是紅細胞而未計入血小板總數中，這也使得血小板計數結果明顯偏低。
大量的輸入血液時會引起血小板減少。這種情況多在4～6d后恢復正常。此外，某些患者在輸血后的1w左右時間內，會出現血小板計數明顯減少的現象。有些治療方法對血小板的計數也會產生較大影響，如血液經光量子血療儀照射后，血小板計數明顯減少，經電鏡觀察發現，照射后的血小板形態不完整，形成大量的偽足及血小板碎片。
EDTA鹽是全自動血細胞計數儀常用的抗凝劑，它能保持細胞形態和防止血小板聚集，而有極少數人血小板在EDTA鹽抗凝后，反而使PLT聚集，EDTA （Ethylene Diamine Tetraacetic Acid）依賴性血小板減少癥（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）是因為EDTA鹽抗凝血中EDTA誘導血小板中的特殊蛋白使得血小板發生了凝集，而且當在全自動血細胞計數儀上檢測時，血小板計數會發生假性減少的現象，血細胞分析儀不能計數凝集的血小板，因此導致本應在正常計數范圍內的血小板可能計數為20×109/L[1]。
當標本中血小板小于20×109/L時，儀器法可信度較差，不能很好地反映血小板的真實數量，也不能保證檢測結果的準確性，采用血涂片間接計數血小板，可較直觀地反映患者血小板數量的多少，尤其對于血小板減少者。但是在某些情況下，假性血小板減少隱藏著真實的血小板減少或者血小板增多[2]，由于血小板生理特性，易粘附、聚集，在PLT
小紅細胞所導致血小板假性增高的100例血小板增高，其中30例假性增高，占30%，主要原因是當MCV20%，血小板直方圖異常，尾部翹起，儀器顯示小紅細胞癥、紅細胞大小不均、缺鐵性等提示，但在日常臨床檢驗工作中，血小板假性增高并沒有引起重視，
綜上所述， 血細胞分析儀計數血小板具有快速、簡便、重復性好等優點。然而，血小板易于粘附、聚集、破壞，常出現血小板計數假性減少現象，這給臨床的準確診斷疾病帶來了一定的困難。造成假性血小板增加或減少的原因復雜，但在臨床中若遇到靜脈抗凝血檢查血小板顯著增加或減少而臨床檢查無體癥時，應立即血涂片染色鏡檢查，這樣可以準確測出異常血液標本的血小板數，在某種程度上保證了異常標本檢測結果的準確性，為臨床提供準確可靠的診療信息，以免患者誤診、誤治。
參考文獻：
[1]邢忠海，劉東聲.EDTA依賴性血小板減少的分析與對策[J].實用醫學雜志，2011，27（3）：507-508.
[2]李盛龍，趙丹.乙二胺四乙酸鹽依賴性假性血小板減少癥研究進展[J].基層醫學論壇，2012，16（19）： 2551-2553.
【關鍵詞】嗜酸性粒細胞計數；全自動血細胞分析儀；計數性能 文章編號：1004-7484（2013）-12-7491-01
嗜酸性粒細胞在某些過敏性炎癥及某些寄生蟲病、傳染病和血液病時均可增高。現國內大多采用外周血嗜酸性粒細胞分類計數法進行檢測，操作較費時費力。近年來，隨著全自動血細胞分析儀的應用，使嗜酸性粒細胞計數的儀器化成為可能。SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀采用半導體激光的流式細胞及組化染色原理進行白細胞分類計數，能將白細胞分為嗜中性、嗜酸性、嗜堿性粒細胞及單核和淋巴細胞五類。為了了解該儀器對嗜酸性粒細胞計數結果的準確性，我選擇了200份EDTA-K2抗凝靜脈全血分別用SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀、手工分類法進行嗜酸性粒細胞計數，并將結果進行統計學處理。
1材料與方法
1.1儀器日本SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀；日本產OLYMPUS顯微鏡。
1.2試劑日本東亞公司生產SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀原裝進口配套試劑，EDTA-K2真空抗凝管，瑞氏―姬姆薩染液及PH6.4-6.8磷酸鹽緩沖液。
1.3標本來源200例我院住院患者。
1.4方法采取患者靜脈標本2ml注入EDTA-K2真空抗凝管中，在25℃室溫下3h內檢測完畢。將經過儀器檢測完畢的患者抗凝標本制作成薄厚適宜的血片，依據全國臨床檢驗操作規程[1]，用瑞氏-姬姆薩染液染色后，選擇經驗豐富、技術熟練的檢驗人員在油鏡下計數分類200個白細胞，兩種方法計數分類的嗜酸性粒細胞結果進行比較。
1.5統計方法使用SPSS10.0軟件進行配對t檢驗。
2結果
由于嗜酸性粒細胞在整個粒系系統中所占比例相對較少，因此，依據儀器分類計數結果將200例標本分為≤2%和>2%兩個區間進行兩種方法的相關性分析，結果顯示：當嗜酸性粒細胞≤2%時，儀器法與手工鏡檢法差異有統計學意義（P2%時，兩種方法差異無統計學意義（P>0.05），顯示很好的相關性，相關系數r=0.959。
3討論
SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀采用一束半導體激光照射標本，并依據每個細胞產生的信號來相互區分。當患者的白血胞表面物質及內部結構沒有大的改變時，可以進行正確的白細胞分類，得出正確的結果[2]。XN-1000全自動血細胞分析儀的DIEF通道可將白細胞分成五類。當嗜酸性粒細胞≤2%時，儀器法明顯高于手工鏡檢法（P
參考文獻
[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜，主編.全國臨床檢驗操作規程[M].南京：東南大學出版社，2006：124.
【中圖分類號】R446.11 【文獻標識碼】 B 【文章編號】1005-0515(2010)006-063-02
PE-6300全自動血細胞的計數原理是以血細胞通過寶石微孔傳感器的過程中產生的阻抗變化為基礎的。對全血細胞20項指標進行直接、間接測定,是血細胞三分類儀。儀器具有操作簡單,吸樣自動清洗,自動排除堵孔等功能,并具有靜脈血、末梢血和預稀釋三種模式,全自動血細胞分析儀從設計上均要求使用抗凝靜脈血來檢測,但門診上以預稀釋模式較為方便,因此本文對其中的白細胞、紅細胞、血小板計數測定結果作一分析。
1. 材料與方法
1.1 標本來源和處理:隨機選取每天門診18-45歲患者20例,共五天100例,靜脈血模式采用EDTA.K2.2H2O作抗凝劑。末梢血的采集,按本專業末梢血采集規范進行,血液樣品在測試前均進行上下搖動,轉動試管3-5分鐘進行充分混勻。
1.2 儀器與試劑:深圳市普康電子有限公司生產的PE-6300全自動血細胞分析儀,試劑均為配套試劑,手工試劑均按《全國臨床檢驗操作規程》第三版要求配劑。
1.3 方法:儀器操作嚴格按說明書操作,手工方法按《全國臨床檢驗操作規程》第三版要求操作,每份樣本測定2次,取平均值。
1.4 統計學方法:測定結果采用配對樣本t檢驗
2. 結果
100例標本分別采用手工法,儀器靜脈血模式及儀器預稀釋模式,結果見表1。測定結果經配對樣本t檢驗后,儀器靜脈血模式和手工法比較P>0.05,測定結果差異無統計學意義。儀器預稀釋模式下紅細胞和血小板和手工法相比,P
1. 討論
PE-6300全自動血細胞分析儀血液樣本測試所得參數由三種方法得到:由儀器直接測量所得參數,如WBC,RBC,PLT,HGB;根據直方圖得出的參數LYM%,MID%, GRAN%, MCV, RDW-SD, RDW-CV, MPV, PDW, P-LCR;根據公式、方法計算、推導所得參數,LYM#,MID#,GRAN#,HCT,MCH,MCHC,PCT。血紅蛋白手工法采用氰化高鐵血紅蛋白測定法,儀器法采用血液中加入溶血素后,血紅蛋白與溶血素結合生成穩定的類氰化高鐵血紅蛋白,都在540nm處有一個吸收峰,兩者原理一致,所以在此只對紅細胞、血小板計數做如下分析。
PE-6300全自動血細胞分析儀是以血細胞通過寶石微孔傳感器的過程中產生的阻抗變化為基礎,細胞通過計數孔時在兩個電極之間的電阻隨細胞體積的增加而增加,根據歐姆定律公式U=RI,可知U隨細胞體積的增加而增加。儀器具有雙計數池,一個測量計數池和檢測電路對白細胞進行計數、分析,另一個測量計數池和檢測電路對紅細胞、血小板進行計數、分析。
在血液標本測定中,靜脈血模式測定結果與手工方法測定結果差異無統計學意義,而預稀釋模式測定結果中紅細胞、血小板與手工法測定結果差異有統計學意義。通常吸樣針吸取血樣后,紅細胞和血小板在同一個計數池內計數分析,儀器通過其預置軟件將紅細胞(82-98fl)、血小板(2-35fl)按照體積大小分群,使得正常血樣中紅細胞、血小板體積有明確的分界線,再加上該分析儀器在血小板計數中采用了先進的流體、電子、軟件處理系統,有效地解決了在寶石微孔計數區一側部分血細胞的重復計數以及對異常樣本,如小紅細胞,破碎紅細胞,巨大血小板聚集時的分界,所以靜脈血模式測定結果與手工法測定結果差異無統計學意義。而應用預稀釋模式測定,用微量吸管吸樣,可能吸入了組織液,以及稀釋液雜質及空氣中的塵埃等諸多因素影響,再加上該儀器在測定紅細胞血小板時稀釋比例為1:32000,使得計數池稀釋倍數較靜脈血模式增加了,使得細胞直方圖上的分界線產生了的偏差,造成了預稀釋模式測定結果中紅細胞、血小板計數與手工法測定結果差異有統計學意義。因此預稀釋模式在門診應用中要做到:采血時,若血流不暢,可在傷口的遠端稍加壓,切忌在采血部位邊緣用力擠壓,避免組織液混入血液,造成測試分析結果不準確;加入定量稀釋液時,要斜置一次性試管于采樣針下,使稀釋液沿管壁流下,避免產生氣泡:對于超出參考范圍的樣本,一定要結合臨床表現,盡可能采用靜脈血模式,同時要對儀器提供的十二個參數特別是紅細胞、白細胞、血小板每天進行質控,保證測定結果的準確性,以滿足臨床需要。
參考文獻
【關鍵詞】Bayer ADVIA 2120;全自動血細胞分析儀;線性范圍驗證;血小板分離;多樣本
Analysis of the linear range of the platelet separated from multi-samples at Bayer ADVIA 2120
WU Shao-zhen,DENG Kun-yi,MAI Wei-xia,et al.Boai Hospital of Zhong Shan city,Zhong Shan 528403,China
【Abstract】ObjectiveTo verify the linear range of the platelets at Bayer ADVIA 2120 analyzer.MethodsAccording to ISO15189 EP6-A,platelet separated from 250 samples to verify the linear range at Bayer ADVIA 2120 analyzer.ResultsHigh concentrations of platelet can obtained from mixing multi samples.Coefficient of Variance of within-run and between-day was3.0% and 3.6%,carry-over was0.02%,platelet range at 21-4918 × 109/L Showed a linear relationship.ConclusionRegardless of blood type,high concentrations of platelet can obtained from mixing multi samples.Bayer ADVIA 2120 automated hematology analyzer has good feafures of precision,linearity,low carry-over,is a perfect performance analyzer.
【Key words】
Bayer ADVIA 2120;Full-automatic blood cell’s analyzer; The linear range ; Separation of platelets; Multi-samples
根據ISO15189醫學實驗室認可和《醫療機構臨床實驗室管理辦法》規定,儀器在進行臨床樣本檢測前,需進行全面的性能評價,因此我們按國際血液學標準化委員會(ICSH)指南[1]從不精密度、不準確度、線性范圍、攜帶污染率等幾個方面對Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀的血小板線性范圍進行了驗證,由于該儀器血小板的線性范圍為0-3500×109/L,線性范圍極寬,高濃度血小板極難收集,在線性驗證過程中困難重重,現介紹一種簡單易行且易于操作的方法供大家參考。
1材料和方法
1.1儀器Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀;儀器使用其配套的試劑、校準品和質控全血。
1.2樣本本院體檢中心EDTA-K2抗凝全血樣本。
1.3實驗方法
1.3.1不精密度評價
1.3.1.1批內不精密度CV%要求不大于CLIA,88[2]要求的總誤差的1/4即6.25%;取本院體檢中心EDTA-K2抗凝全血樣本10份,每份樣本檢測2次,得到X1和χ2,用雙份檢測標準差來表示檢測反映的離散程度。
1.3.1.2天間不精密度采用配套質控全血,連續檢測20 d,計算均值、標準差和變異系數。
1.3.2不準確度評價采用ADVIA 2120與通過衛生部臨檢中心室間質評取得優良成績的CD1700血液分析儀進行比對評價,比對時間為5 d,共做40份標本,每天做8份當天新鮮標本,所有實驗在2 h內完成。盡可能使50%的比對標本不在參考區間內,各個標本分析物含量越寬越好。各實驗結果點于X、Y座標紙上,圖中標出斜率為1通過零點的直線。要求r≥0.975或r2≥0.95。線性回歸統計Y=bX+ab代表斜率,a代表截距。根據PLT臨床使用要求,在各個臨床決定水平濃度Xc處(PLT通常以50/100/300/800)的濃度,了解Y方法引入后相對于X方法的系統誤差(SE)。
SE=|Yc-Xc|=|(b-1)Xc+a |
計算Xc處系統誤差,以系統誤差(SE)≤1/2 CLIA,88允許誤差即12.5%為標準,以Xc處SE符合不小于3個為該檢測項目符合檢驗科準確度性能要求。
1.3.3線性范圍驗證評價①取當天新鮮體檢EDTA-K2抗凝全血標本250份;②800轉離心7 min,吸取上層富含PLT血漿混合(約150 ml分15支膠試管)備用;③富含PLT血漿800轉離心7 min,底層RBC層棄去;吸取上層血漿混合,1500轉離心10 min,吸出上層血漿再3000轉離心10 min吸出上層血漿為L,混合底層 PLT層約3.5 ml為H;④以鞘液當樣本檢測3次歸零,再連續H 3次、L 3次、0.1H+0.9L 2次、0.2H+0.8L 2次、0.3H+0.7L 2次、0.4H+0.6L 2次,0.5H+0.5L 2次,0.6H+0.4L 2次,0.7H+0.3L 2次,0.8H+0.2L 2次,0.9H+0.1L 2次,分別在2120上測定;⑤吸出H 5ul推成薄片,經瑞氏染色晾干后油鏡觀察;⑥對照試驗:取體檢中心EDTA-K2抗凝O型全血樣本10份,重復②至③步驟,只留下底層約0.5 ml PLT層為H對照,在2120上測定2次,并吸出H對照5 μl推成薄片,經瑞氏染色晾干后油鏡觀察。
1.3.4攜帶污染參考有關文獻[3]: 以鞘液當樣本檢測3次歸零,再連續H 3次、L 3次,然后計算攜帶污染率,計算公式為:(L1-L3)/(H3-L3)×100%。
1.4統計學方法所有數據進行t檢驗;使用SPSS13.0統計分析軟件進行多項式回歸分析評價線性。
2結果
2.1精密度試驗Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀PLT批內不精密度CV為3.0%,天間不精密度CV為3.6%,CV%均小于6.25%,符合總誤差不大于1/4CLIA,88的要求。
表1
Bayer ADVIA 2120 PLT精密度
項目1/4CLIA,88(CV%)批內不精密度(CV%)天間不精密度(CV%)
PLT6.253.03.6
2.2不準確度試驗ADVIA 2120全自動血細胞分析儀與CD1700血液分析儀進行PLT比對,r為0.981,r2為0.962,Xc處系統誤差符合檢驗科準確度性能要求。
表2
Bayer ADVIA 2120 PLT準確度
儀器T檢驗回歸方程(Y=)SE=|(b-1)Xc+a|Xc處系統誤差(%)符合性
21200.461Y=0.961X+3.697│(0.961-1)Xc+3.697│3.49/0.20/2.67/3.44符合
2.3線性范圍驗證評價
將濃縮的PLTH值、L值稀釋成11個濃度后,將檢測結果與預期值(見表3),用EP6-A[4]法的多項式回歸分析評價線性(見表4)。ADVIA 2120 全自動血細胞分析儀PLT在21~4918×109/L范圍內呈一項次線性關系。
表3
Bayer ADVIA 2120 PLT線性驗證測定表
標本號1234567891011
測量值120568114416882256284333373850443049255428
測量值221577114716142237278033183837436549105431
均值21573114616522247281233283844439849185430
預期值21562110216432185272632663870434848895430
表4
Bayer ADVIA 2120 PLT多項式回歸分析評價線性分析結果
階別系數數值系統誤差t檢驗回歸標準誤自由度
1st b1549.2333.363163.34026.04620
2ndb2-2.5061.234-2.03121.65519
3rdb2-1.7999.515-0.189
3rdb3-0.0470.628-0.07523.70918
2.4對照試驗H管涂片鏡下見WBC、RBC偶見,PLT極為多見,單個散在分布,結構基本完整,形態基本正常,片尾見少量PLT聚集,形態結構基本正常,與儀器檢測顯示WBC:1.5×109/L;RBC:0.27×1012/L;PLT:5430×109/L和警告提示PLT聚集“1+”相符;H對照管涂片鏡下見WBC、RBC偶見,PLT極多見,單個散在分布,結構基本完整,形態基本正常,片尾見少量PLT聚集,形態結構基本正常,與儀器檢測顯示WBC:1.2×109/L;RBC:0.21×1012/L;PLT:1150×109/L和警告提示PLT聚集“1+”相符。此試驗證明血型不合對提取分離PLT無直接影響。
2.5攜帶污染結果PLT攜帶污染結果為0.02%,符合儀器顯示
3討論
通過對Bayer ADVIA 2120全自動血細胞分析儀PLT的線性范圍驗證評價,得出其檢測血小板的批內和天間不精密度分別為3.0%和3.6%,攜帶污染率為0.02%,與吳新忠等人報道的基本相符[3],符合ICSH標準和ISO15189的要求;線性范圍寬,超出儀器說明書申明的線性范圍,在21~4918×109/L范圍內仍呈良好線性關系。
任意混合多樣本分離、濃縮PLT成功的原因分析為:
3.1因PLT表面具有復雜的血型抗原,由遺傳因素決定,可分為血小板非特異性抗原和血小板特異性抗原;非特異性特原與紅細胞血型、HLA血型的抗原有關;特異性抗原由血小板特有的抗原簇組成,表現出血小板獨特的遺傳多態性,其抗原存在于PLT表面;正常健康人血小板抗體為陰性,因此ABO血型不合的多樣本混合富含PLT的血漿中只有PLT抗原而無抗體,因此即可排除PLT因抗原抗體反應而發生凝集。
3.2因血液中的WBC存在大量的WBC抗原,而正常健康人血液中不含WBC抗體,如此也可排除WBC因抗原抗體反應發生凝集而干擾PLT的檢測。
3.3在實驗中經過步驟1.3.3中②即800轉離心7 min和1.3.3中③的操作即含PLT血漿800轉離心7 min,底層RBC層棄去后,血漿中只存在極少量的RBC和WBC,其抗原比例很少,而即使血漿中含有大量的抗ABO抗體,也達不到抗原抗體反應的最適比,因此也可排除RBC因抗原抗體反應發生凝集而干擾PLT的檢測。
因此多樣本任意混合富含PLT的血漿,可基本排除WBC、RBC和PLT凝集產生的干擾。H管和H對照管儀器均警告提示PLT聚集“1+”,與涂片片尾有少量PLT聚集相符;分析其原因與PLT的生理特性粘附、聚集、釋放、收縮和高濃度相關,少量PLT聚集并沒有對PLT檢測造成大的干擾,觀察聚集的PLT形態結構基本完整,分析其聚集屬于第一時相的可逆聚集時相,對儀器PLT的檢測影響較少,儀器僅顯示PLT聚集“1+”。因此分離、濃縮PLT時采用多樣本任意混合可收集到高濃度的PLT。
參考文獻
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【關鍵詞】血液； 血細胞計數；校準
【中圖分類號】R331【文獻標識碼】A【文章編號】1004-4949（2013）12-152-02
引言：目前血細胞分析儀在各檢驗科的血常規測定中已非常普及，它大大地提高了血細胞分析的效率。但由于儀器的種類繁多，性能差異較大，而且各種儀器的工作原理也不完全相同，完成一個項目測定要受到儀器、試劑、校準品、操作程序以及操作人員等因素影響。因此，如何避免不同儀器之間測定結果的差異，如何提高測定結果的準確性，全面做好血液分析儀的質量控制是一項非常重要的工作。
1材料與方法
1.1材料： （1）儀器和試劑：深圳邁瑞5800全自動血細胞分析儀及配套試劑，法國ABX―60半自動血細胞分析儀及配套試劑。（2）校準物及質控物：ABX-60血細胞分析儀的配套校準物及定值質控（邁瑞公司生產，批號zxll209c，效期：20090916）。（3）EDTA―K2真空抗凝管（山東威海生產，批號20090720，效期201107）。
1.2方法：儀器校準：用校準參考儀器拜耳2120血細胞分析儀之進口原裝配套校準品對其進行校準，再在該儀器上將健康人新鮮抗凝全血連續測定11次，棄去第1次結果，計算其余10次各指標之均值作為新鮮血參考定值。用此定值新鮮血代替校準品對邁瑞5800及拜耳2120兩臺血細胞分析儀進行校準（樣本采集到校準完成4小時內結束）。
比對試驗：選取臨床患者高、中、低值5份新鮮抗凝全血在上述校準后的各臺儀器上與其他樣本一同測定（測平行樣取均值）。以拜耳2120血細胞分析儀所測結果為標準，分別計算邁瑞5800及ABX-60兩臺血細胞分析儀所測結果之偏差（CV%）。
2統計學分析
計量資料以均數±標準差表示，采用成組t檢驗，計數資料采用卡方檢驗以及Ridit檢驗。應用SPSS10.0統計軟件包處理，P
3結果
兩臺血細胞分析儀校準前的重復性測定CV%（均在全血模式下進行）見表1，從表1可以看出，儀器重復性很好，符合校準條件。
4討論
血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標，其結果的準確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細胞分析儀由于計數準確，精密度高，操作簡便、快速，因而發展迅速，已逐漸取代傳統手工方法，成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產血細胞分析儀的廠家多，各自使用的測定原理和方法不盡相同，導致其測定結果及參考范圍有所差異。國內各醫院使用不同廠家和型號的血細胞分析儀已成為普遍現象，致使分析結果呈現不同程度的差異，給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難。
新儀器在安裝調試之后用于臨床測定之前，首先要對新儀器各項性能指標進行初步評估。即按照國際血液學標準化委員會（ICSH）和美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI）的有關規定，對儀器的各項性能指標進行評估，包括儀器的線性范圍、精密度、準確度、抗干擾性、白細胞分類以及攜帶污染率等。有條件的應與其他性能穩定、運行良好、結果具有可溯源性的儀器進行比對。這樣就能對新儀器的各項性能指標的實際情況有一個較全面的了解。
血細胞分析儀的校準直接影響到檢測結果的正確性。可以采取相應的校準方式：（1）應選用儀器商提供的配套血細胞校準品進行校準，這是最理想和最實用的方法，但這種原裝校準品價格比較昂貴且有效期短，不易普及；（2）用新鮮的全血標本進行校準，即用新鮮血液標本在其他已確定用配套校準品校準好且性能穩定的血細胞分析儀上進行測定，測定多次取均值，將測定的結果視為該標本的標準值，來校準需要校準的儀器，這樣也會得到比較滿意的結果，也可以用這種方式來校準同一實驗室內不同血細胞分析儀，確保本實驗室不同血細胞分析儀測定結果的一致性。
不同廠家、不同型號的血細胞分析儀對試劑的要求都不完全相同，由于目前試劑的種類繁多，有進口配套的、國產的以及各實驗室自制的等等。不同的試劑，即使試劑的配方相同，其內在的一些參數也不完全相同，主要包括試劑的pH值、電導率、滲透壓和離子強度等。而血細胞分析儀對以上參數的細微變化都非常敏感，尤其在白細胞分類別敏感。因此，我們建議最好使用儀器配套原裝試劑，保證儀器測定結果的準確性。
參考文獻
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達州市婦幼保健院檢驗科，四川達州 635000
[摘要] 目的 分析全血細胞分析以及白細胞分類中復檢規則的制定情況。方法 選取不同科室的1400份血樣本，均分別采用xs-1000i型全自動血球分析儀檢測，同時進行鏡檢，以鏡檢結果作為診斷結果參照標準，制定暫行復檢規則，并應用于全血細胞分析以及白細胞分類中，同時根據復檢情況制定出更具可行性的復檢規則。結果 現行復檢規則的復檢率為25.3%（暫定復檢規則復檢率為31.2%），復檢率明顯降低，提高了臨床對血細胞的檢測效率。結論 本文所制定的復檢規則臨床應用價值明顯提高，但今后還需在實踐中進一步作調整。
[
關鍵詞 ] 白細胞分類；全血細胞分析；復檢規則
[中圖分類號] R733 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2014）05（b）-0022-03
血細胞分析儀在當前臨床多種疾病診斷中有重要的應用價值，但因僅采用血細胞分析儀存在一定的異常病理標本的誤漏診現象，需要進一步行復檢工作，以保證檢驗結果的準確性[1-2]。本文即對我院實驗室在全血細胞分析以及白細胞分類中的復檢規則作具體探析，以為臨床在血細胞分析中合理制定復檢規則提供參考。現匯報如下。
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1標本來源 從2010年7月—2013年7月我院新生科、普兒科以及婦科、產科等科室收集1400例患者的血樣本，患者年齡均在0個月~68歲，平均（31.7±8.3）歲；其中，住院血樣本637分，門診血樣本763份；1131例為初診樣本，269例為復診樣本。
1.1.2試劑與儀器 均使用xs-1000i型血球分析儀以及相配套的原裝試劑、質控和校準物；同時，使用奧林巴斯生產的雙筒顯微鏡進行顯微鏡檢，染色采用瑞-姬染液，真空抗凝管使用EDTA K2型（成都瑞綺）。
1.2方法
1.2.1儀器檢測方法 分別采集靜脈血液2 mL，注入真空抗凝管中，并于2h內完成所有樣本的檢測。檢測中按照儀器操作說明，并嚴格在規范的質控條件下完成。
1.2.2鏡檢方法 將所有樣本均進行血涂片測定，均推血涂片2張，且每張WBC計數均為100個，采用瑞-姬染色，分類計數均由2名主管醫師（工作經驗均在10年以上）分別完成，并取2人所得結果的均值作為實驗室檢測結果[3]。
1.3暫定復檢規則制定方法與評估方式
1.3.1制定方法 對血球分析儀檢測后生成的初檢實驗結果進行統計，并結合我院特色以及科室臨床實踐情況等，同時參考“國際范圍41條規則” [4]，暫時制定出復檢規則。具體情況見表1。
1.3.2評估方式 所有樣本均同時行鏡檢后統計相應結果，并作為診斷的金標準，同時，以金標準為參照，對暫定出的復檢規則作合理評估。評價結果包括：a.真陰性—診斷結果與暫定規則相一致，且鏡檢結果提示為陰性；真陽性—診斷結果與暫定規則相沖突，且鏡檢結果提示為陽性；假陰性—診斷結果與暫定規則相一致，但鏡檢結果提示為陽性；假陽性—診斷結果與暫定規則相沖突，但鏡檢結果提示為陰性[5-6]。
1.4分析指標
①對全血細胞參照暫定復檢規則的假陽性率，以及白細胞參照暫定復檢規則的分類情況分別作統計分析；②對復檢規則的制定情況統計。
1.5統計學分析
用spss 16.0軟件對以上相關數據作處理分析，χ2檢測計數數據，多因素對比用Logstic回歸法分析，P＜0.05為對比差異具有統計學意義。
2結果
2.1全血細胞參照暫定復檢規則的假陽性率
檢測結果統計顯示，規則1、10、二項規則在檢測中未見同種情況，其余規則中，規則15、16、17、18、出現假陽性率相對較高，均在2.0%以上，以規則17假陽性率最高（6.86%，P＜0.05）。詳見表2。
2.2白細胞參照暫定復檢規則的分類情況
參照暫定復檢規則進行白細胞分類后顯示，嗜酸粒細胞高于1%的異常情況出現率（2.21%）最高（P＜0.05）；中性粒細胞高于80%以及淋巴細胞低于20%兩種異常情況的出現率（分別為1.57%和1.07%）相對于其他情況更高（P＜0.05）。見表3。
2.3復檢規則制定情況
根據暫定復檢規則在全血細胞分析以及白細胞分類中的應用情況，同時本院特色以及科室臨床實踐經驗等，并經專業醫師研討后制定出可行性更高的復檢規則。見表4。
3討論
血細胞分析儀在多種血液疾病的診斷中有重要的應用價值，對提高診斷效率以及準確率，為患者爭取寶貴治療時間有積極意義，但同時，采用血細胞分析儀在進行全血細胞分析以及白細胞分類時，因存在一定的假陽性，容易導致臨床出現誤診；通過制定合理的復檢規則，提高全血細胞儀的應用價值，減少復檢工作量，并提高診斷準確度[7-8]。
本文以我院采用xs-1000i型血球分析儀進行全血細胞分析以及白細胞分類情況為例，對復檢規則的合理制定作了探析。結果顯示，在全血細胞分析中，規則15、16、17、18出現假陽性率相對較高，均在2.0%以上，以規則17假陽性率最高（6.86%，P＜0.05）；進行白細胞分類情況顯示：嗜酸粒細胞高于1%情況出現率（2.21%）最高（P＜0.05）；中性粒細胞高于80%及淋巴細胞低于20%出現率（分別為1.57%和1.07%）相對更高（P＜0.05）。
規則17中異常淋巴細胞或不典型細胞以及規則15中核左側移動或幼稚粒細胞出現假陽性率較高，考慮多數因細胞的分布出現異常而致檢測結果呈現為假陽性；考慮因xs-1000i型血球分析儀計數血小板和參考方法間存在較明顯的相關性；規則18中PLT聚集考慮與采血過程中存在不規范操作等有關。在考慮以上出現假陽性偏高相關因素，同時結合白細胞分類中假陽性率偏高的情況，對暫定的附件規則作相應的調整，并制定出我院現行使用的復檢規則（本文表4）。將現行的復檢規則應用于臨床進行全血細胞分析以及白細胞的分類實踐并作相關統計后顯示，現行復檢規則的復檢率為25.3%（暫定復檢規則復檢率為31.2%），復檢率明顯降低，明顯提高了臨床對血細胞的檢測效率。
綜上可知，在全血細胞分析以及白細胞分類中制定合理的復檢規則，對提高血細胞的檢測效果有積極意義。
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參考文獻]
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關鍵詞 外周血細胞 形態學檢查 重要性
隨著科學的發展各種自動化儀器的不斷的運用于日常的檢驗工作血液檢驗進入了新階段幫助檢驗者簡化了許多繁瑣的操作步驟節省了大量的人力物力提高了檢驗速度提高了工作效率。然而隨著血液分析儀的普及忽視了傳統的顯微鏡對血常規檢查的形態學檢查以至體液中的紅、白細胞也辨認不清;瘧原蟲漏檢時有發生報告中見不到紅、白細胞形態學的描述連中性粒細胞毒性病變也從報告單中絕跡漏檢、漏診、誤診的現象屢有發生。應當加強對檢驗人員的定期培訓制定相對應的措施減少此類事件的發生避免漏診誤診減少病人的支出縮短病人就診時間以免影響患者診斷和延長治療時間。
筆者從事基層臨床檢驗工作近年一直十分重視臨床檢驗工作中標本的顯微鏡的形態學檢查走訪了許多鄉鎮衛生院的實驗室發現血細胞分析儀和尿液分析的結果已完全代替了傳統的檢驗顯微鏡已成檢驗室里的一個擺設了。筆者從自己工作的檢驗室對人次的外周血標本在用血細胞分析儀對外周血血細胞分析的同時進行傳統的顯微鏡檢查二者對照完全穩合者不到%其原因分析如下。
血細胞分析儀本身對白細胞的分類就是不準確的
依據血液分析儀將外周血細胞化分為三群:淋巴細胞;中間細胞MID指細胞體積在9-16fl之間的中間細胞區主要包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞核左移的各階段幼稚細胞或白血病時白血細胞。第三群是大細胞區主要是中性粒細胞GRAN。血細胞分析儀對白細胞的分類本身就是不準確的產生這種結果的原因是這種分析儀工作原理的缺陷。這種分析儀其原理是電阻抗法――即將外周血按一定比例稀釋后送到儀器的檢測單元檢測單元微孔的兩側有一對正負電極連接恒流電源。由于血細胞屬不良導體稀釋液中的細胞在恒定負壓作用下一個個通過微孔時電極間的電阻突然增加形成電流的變化從而在儀器產生一個個的脈沖信號脈沖變化的次數與通過微孔的細胞數一致而脈沖的幅度與細胞的體積成正比。儀器根據各群占總體的比例計算出各群的百分率如果與該標本的白細胞總數相乘即得到各類細胞的絕對值。可以看出儀器電阻法只是根據細胞體積的大小將白細胞分成幾個群體。如果將以手工顯微鏡法分類補償可以使結果可靠。
無法識別外周血液中血常規被破壞
外周血液中的白細胞在正常狀況下骨髓按一定的規律將成熟的白細胞釋放入外周血而在許多病理因素的作用下這種規律被破壞。如在急性感染時由于機體抗感染需要骨髓釋放大量的白細胞入外周血使外周血中出現較幼稚的白細胞此時較幼稚白細胞的體積將與外周某正常的體積形成交叉;又如在血液系統疾病時如各種急慢性白血病及各種原因引起的嚴重貧血外周都會有不同程度的異常細胞在這種情況下無論是三分群還是五分類的血細胞分析儀均不能準確的進行分類;在嚴重貧血的病人外周血液中會出現有核的紅細胞這些有核紅細胞也會當作白細胞而計數
從而影響血細胞分析儀計數的準確性。
無法識別中性粒細胞的核左移和細胞結構變化
在急性感染時外周血中中性粒細胞顯著增多時出現明顯的核左移并出現體積大小不均這都使血細胞計數儀不能進行準確的計數和分類。另外血細胞分析儀不能識別外周血的結構變化如紅系的Howell-Jolly小體、Cabot環、點彩紅細胞及有核紅細胞等;粒系的中毒顆粒、空泡變性、杜勒體、核變性等淋巴系中的異常淋巴、淋巴細胞的衛星核等。血細胞分析儀均不能識別。
只能粗糙的對血細胞進行分類
血細胞分析儀本身尤其是三分群的血細胞分析儀都只能粗糙的對血細胞進行分類它的中間細胞群包括正常的嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞以及在病理狀態下異常細胞。如利用Coulter JT-IR血細胞分析儀檢測外周血液只能將白細胞分為淋巴細胞百分率GR、單核細胞百分率Y、粒細胞百分率MO三個群對嗜酸粒細胞EO則不能很好地區分產生這種結果的原因是這種分析儀工作原理的缺陷。
無法識別血小板體積差
眾所周知血小板體積差異大大的和巨大血小板在體積上與小紅細胞相差不大這也使血細胞難以準確對其進行計數。另外血小板在體積上的差異也反映在功能上臨床上許多病人有明顯的出血體征但血小板計數在正常范圍此時作為檢驗者應當進行血涂片做常規染色檢查在涂片上觀察血小板有無大小不均有無巨大血小板和小血小板以及血小板形態有無改變胞質的染色性顆粒的有無多少粗細等以及血小板的在涂片上的分布情況是成群、成堆或成片集聚一起還是散在分布。
其他因素
某些血液寄生蟲及惡性腫瘤的骨髓轉移都必須進行形態學的檢驗才能加以識別從而做出正確的診斷。傳統手工計數和分類準確性也受許多因素的影響。取決于操作者的技術水平、責任心以及是否遵循醫學檢驗的操作規程等。
